2002 Fiscal Year Annual Research Report
シナプス後部にmRNAが局在する新規分子(Dem)の遺伝子クローニングと機能解析
Project/Area Number |
13680839
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Research Institution | Shinshu University |
Principal Investigator |
鈴木 龍雄 信州大学, 医学部, 教授 (80162965)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田 慶宝 信州大学, 医学部, 助手 (40324264)
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Keywords | シナプス後肥厚部 / PSD / local protein synthesis / シナプス可塑性 / postsynaptic density |
Research Abstract |
シナプス後部にmRNAが局在する遺伝子(Dem遺伝子)を網羅的に同定しようとするプロジェクトにおいて発見した新規の遺伝子について,完全長のcDNAのクローニングとそれらの性質,および機能解析を進めた.いくつかの新規完全長遺伝子をクローニングし遺伝子登録を行った.新規遺伝子について以下の事を明らかにした。 (1)SynUSP:脱ユビキチン酵素活性を証明した。またtwo hybrid法により,選択的に相互作用するタンパク質を同定した。何度かのトライののち,良質の抗体を作成することができた。 (2)synArfGEF:特異抗体を持ちい,タンパク質の発現部位をラット脳で明らかにした。 (3)ssLRP:外国との共同研究であるが,ligandを同定するための道具として,LRP null cellへのssLRP stable stransformantの作成を試みたが,合成されたssLRはtrans Golgiでトラップされて細胞膜にうまく組み込まれなかった。引き続き別の方法でligandを同定する計画を進めている。 (4)他のDemで,PSDのscaffold proteinとしての機能が考えられるTANCとp55Lの完全長遺伝子をクローニングし,Pull-down法により,結合タンパク質を同定した。引き続き,免疫共沈法などを用いて結合タンパク質を明らかにする計画である。両タンパク質ともに,抗体を作成した。 synUSPとssLRPについては,ノックアウトマウスを作成して,さらに生理機能,病態との関連を明らかにすべく計画している。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Konno D, Ko JA, Usui S, Hori K, Maruoka H, Inui M, Fujikado T, Tano Y, Suzuki T, Tohyama K, Sobue K: "THE postsynaptic density and dendritic raft localization of PSD-Zip70, which contains an N-myristoylation sequence and leucine-zipper motifs"J Cell Sci. 115. 4695-4706 (2002)
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[Publications] 鈴木 龍雄: "シナプス後部におけるシグナルプロセッシングの分子基盤"生体の科学. 53. 157-162 (2002)
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[Publications] Suzuki T: "Lipid raft at the postsynaptic sites : distribution, function and linkage to postsynaptic density (PSD)"Neurosci. Res. 44(invitedreview). 1-9 (2002)
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[Publications] Okano A, Usuda N, Frihata K, Nakayama K, Tian QB, Okamoto T, Suzuki T: "Huntingtin-interacting protein-1-related protein of rat (rHIP1R) is localized in the postsynaptic regions"Brain Res.. (in press). (2003)
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[Publications] Asaki C, Usuda N, Nakazawa A, Kametani K, Suzuki T: "Localization of Translational components at the ultramicroscopic level at postsynaptic sites of the rat brain"Brain Res.. (in press). (2003)
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[Publications] 鈴木 龍雄: "シナプス後部lipid raftとシナプス後肥厚部(PSD)"生体の科学. 54(in press). (2003)