2001 Fiscal Year Annual Research Report

腸管出血性大腸菌の持つ様々な病原因子遺伝子の多様性に関する研究

Research Project

Project/Area Number	13770145
Research Category	Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
Research Institution	National Research Institute for Child Health and Development
Principal Investigator	中尾浩史国立小児病院, (小児医療研究センター)・感染症研究部, 研究員 (20237217)
Keywords	腸管出血性大腸菌 / 志賀毒素 / σ因子
Research Abstract	腸管出血性大腸菌は多くの病原性因子を持つことが知られており、個々の因子に関する研究は進みつつある。しかし、病原因子遺伝子の多くには多様性(変異)があり、この多様性がどの程度存在するのか、また、多様性がどのようにヒトへの病原性に影響を与えるかについてはあまり調べられていない。本研究は腸管出血性大腸菌の持ついくつかの病原因子の多様性を調べることにより、それぞれの因子の機能解析を行うことを目的とする。 Stx遺伝子についてはほぼ解析を終えているため、次にrpoSの解析を行うこととした。rpoSは腸管出血性大腸菌の持っストレス耐性(酸、凍結、乾燥など)に関与しており、ストレスに応じる遺伝子の発現制御を行っていると考えられている。SSCP法によりrpoSの多様性を調べることとした。SSCPのために4セットのPCRプライマーを設計し、それぞれのセットに対して最適化を行った。10株を用いて、増幅した断片をSSCPの条件について検討した結果、10株という限られた数においても多くの異なるSSCPパターン(変異)が認められた。しかし、PCR-SSCPでは、再現性の面でやや問題があること、また、似た泳動パターンを示す株間の比較は同一ゲルにおいて泳動しないとできないことなどはPCR-SSCPを通常のポリアクリルアミドゲルで分析することの限界と考えられた。この問題を克服するために、ABl Genetic Analyzer 310を用いたCapillary Electrophoresis SSCP(CE-SSCP)法を用いて分析を行っている。現在、最適化が終わり、患者分離株を用いて解析を行っているところである。一部の株のみの解析結果であるが、rpoSの変異は5'側から中間領域にかけて存在し、3'側は保存されていることがわかっている。

Research Products

(5 results)

All Other

All Publications (5 results)

[Publications] Nakajima T, et al.: "Single step method for purification of Shiga toxin1 B subunit using receptor mediated affinity chromatography by globotriaosylceramide conjugated Octyl Sepharose CL-4B"Protein Expres Purif. 22. 267-275 (2001)
[Publications] Ohmi K.et al.: "Nitrobenzylthioinosine(NBT), a nucleoside transport inhibitor, protects against Shiga toxin cytotoxicity in human microvascular endothelial cells"Endothelium. 8. 261-268 (2001)
[Publications] Nakajima, H.et al.: "Kinetic analysis of binding between Shiga toxin and receptor glycolipid Gb3Cer by surface plasmon resonance"J. Biol.Chem.. 276. 42915-42922 (2001)
[Publications] 中尾浩史: "疾病別臨床研究:最近の動向-モノクローナル抗体療法の位置づけ-3. 消化器系腸管出血性大腸菌感染症"日本臨牀. 60. 454-550 (2002)
[Publications] 中尾浩史: "ジフテリア"日本臨牀本邦臨床統計集. 59. 55-62 (2001)

2001 Fiscal Year Annual Research Report

腸管出血性大腸菌の持つ様々な病原因子遺伝子の多様性に関する研究

Principal Investigator

中尾 浩史 国立小児病院, (小児医療研究センター)・感染症研究部, 研究員 (20237217)

Research Products

[Publications] Nakajima T, et al.: "Single step method for purification of Shiga toxin1 B subunit using receptor mediated affinity chromatography by globotriaosylceramide conjugated Octyl Sepharose CL-4B"Protein Expres Purif. 22. 267-275 (2001)

[Publications] Ohmi K.et al.: "Nitrobenzylthioinosine(NBT), a nucleoside transport inhibitor, protects against Shiga toxin cytotoxicity in human microvascular endothelial cells"Endothelium. 8. 261-268 (2001)

[Publications] Nakajima, H.et al.: "Kinetic analysis of binding between Shiga toxin and receptor glycolipid Gb3Cer by surface plasmon resonance"J. Biol.Chem.. 276. 42915-42922 (2001)

[Publications] 中尾 浩史: "疾病別臨床研究:最近の動向-モノクローナル抗体療法の位置づけ-3. 消化器系 腸管出血性大腸菌感染症"日本臨牀. 60. 454-550 (2002)

[Publications] 中尾 浩史: "ジフテリア"日本臨牀本邦臨床統計集. 59. 55-62 (2001)

中尾浩史国立小児病院, (小児医療研究センター)・感染症研究部, 研究員 (20237217)

[Publications] 中尾浩史: "疾病別臨床研究:最近の動向-モノクローナル抗体療法の位置づけ-3. 消化器系腸管出血性大腸菌感染症"日本臨牀. 60. 454-550 (2002)

[Publications] 中尾浩史: "ジフテリア"日本臨牀本邦臨床統計集. 59. 55-62 (2001)