2001 Fiscal Year Annual Research Report
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13770581
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
鈴木 章一 長崎大学, 熱帯医学研究所, 助手 (40253695)
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| Keywords | IRF-4 / 樹状細胞 / 分化 / 転写因子 |
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| Research Abstract |
A.In vtro解析(マウス骨髄細胞培養系を用いた解析)
1.IRF4ノックアウトマウス(IRF4KO)の骨髄細胞由来樹状細胞(BM-DC)の抗原提示能の解析
CD4T細胞へのオブアルブミン特異的抗原提示能を調べた結果、CD4T細胞のIL-2産生が認められず、増殖もしないことからIRF4KOのBM-DCの抗原提示能はないことがわかった。
2.IRF-4により発現が制御される遺伝子の検索
(1)RT-PCR法によりDCの分化を規定する転写因子(PU.1,Ikaros, ReIB)とDCが産生するサイトカイン(IL1β,IL12,IL18,TNFa, IFNγ)のmRNA量を野生型マウス(wt)由来のBM-DCとIRF4KO由来のBM-DCとで比較した。INFγ,IL12はIRF4KO由来のBM-DCで発現量が低下していた。一方、IL1β,IL18は増加していた。
(2)フローサイトメトリーによりMHCクラスII、共刺激分子(CD40,CD80,CD86)の発現量をwt由来のBM-DCとIRF4KO由来のBM-DCとで比較した。MHCクラスIIの発現量はIRF4KO由来のBM-DCで激減していた。すべての共刺激分子の発現がIRF4KO由来のBM-DC(成熟型)でほとんど認められなかった。
B.In vivo解析
各種リンパ器官(脾臓、胸腺、リンパ節、パイエル板)より細胞を単離し、フローサイトメトリーにより樹状細胞(CD11c+/MHC II+)の数をWtとIRF4KOとで比較した結果、IRF4KOの脾臓でのみ樹状細胞の数が減少していることがわかった。さらに脾臓に存在する3種の樹状細胞サブセットのなかで、CD4を発現している樹状細胞のみが著しく減少していることがわかった。
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