2001 Fiscal Year Annual Research Report

悪性神経膠腫に対する腫瘍特異的増幅型ハイブリッドベクターを用いた遺伝子治療

Research Project

Project/Area Number	13770775
Research Category	Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
Research Institution	Jichi Medical University
Principal Investigator	岡田尚已自治医科大学, 医学部, 助手 (00326828)
Keywords	悪性神経膠腫 / 遺伝子治療 / HSV-tk / アデノウイルス / レトロウイルス / アデノ随伴ウイルス / アポトーシス / Bim
Research Abstract	悪性神経膠腫に対する新規遺伝子治療システムを開発するため、以下の検討を行なった。 (1)悪性神経膠腫細胞内でレトロウイルスベクターを産生させる系を開発した。HSV-tkおよびEGFPを発現するハイブリッド治療ベクターAVC2GCTKおよびAVC2GCEGFPを構築した。レトロウイルスを産生させるため、AVC2GCTKまたはAVC2GCEGFPをgag-polおよびVSV-Gを発現するAxTetGPおよびAxTetVSVG、rtTAを発現するAV-rtTA等のアデノウイルスベクターとともに神経膠腫細胞株に感染させた。Doxyの誘導下に様々な組み合わせのMOIにて各々のウイルスの感染を行い、腫瘍細胞からのレトロウイルス産生量および遺伝子発現効率について至適条件を検討した。 (2)正常組織に対して安全性が高いAAVを腫瘍細胞内において増幅し、優れた遺伝子導入効率を有するシステムを検討した。しかし、腫瘍細胞におけるp53の機能異常に依存するだけでは腫瘍特異性が完全ではないことが臨床治験において報告されており、さらに高い腫瘍特異性を獲得するためにAAVの構造蛋白質を腫瘍特異的に発現させる工夫を検討している。 (3)治療遺伝子の効果を上げる手法として、細胞周期非特異的にアポトーシスを誘導するBim遺伝子(BH3因子)およびHSV-tk遺伝子をアデノウイルスベクターを用いて悪性神経膠腫細胞株に導入し、マウス皮下腫瘍モデルにてその相乗作用を検討した。以上の様に、遺伝子導入方法、治療遺伝子および治療方法の各段階における基盤技術の検討を行なうことにより、臨床応用に向けた治療システムの開発が期待される。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Okada, T., et al.: "AAV mediated gene transfer for gene therapy of ischemia-induced neuronal death"Method. Enzymol.. 346. 378-393 (2002)
[Publications] Okada, T., et al.: "Development and characterization of an antisense-mediated. regulation system for adeno-associated virus vector production with introduction of Cre recombinase"Biochem. Biophys. Res. Comm.. 288. 62-68 (2001)
[Publications] Okada, T., et al.: "AV. TK-mediated killing of subcutaneous tumors in situ results in effective immunization against established secondary intracranial tumor deposits"Gene Ther.. 8. 1315-1322 (2001)
[Publications] Muramatsu, M., et al.: "Reversible Integration of the Dominant Negative Retinoid Receptor Gene for ex Vivo Expansion of Hematopoietic Stem/Progenitor Cells"Biochem. Biophys. Res. Comm.. 285. 891-896 (2001)
[Publications] Kanazawa, T., et al.: "Gamma-rays enhance rAAV-mediated transgene expression and cytocidal effect of AAV-HSVtk/ganciclovir on cancer cells"Cancer Gene Ther.. 8. 99-106 (2001)
[Publications] Wang L., et al.: "Delivery of AAV-GDNF prevents nigral neurodegeneration and promotes functional recovery in a rat model of Parkinson's disease"Gene Ther.. (in press).

2001 Fiscal Year Annual Research Report

悪性神経膠腫に対する腫瘍特異的増幅型ハイブリッドベクターを用いた遺伝子治療

Principal Investigator

岡田 尚已 自治医科大学, 医学部, 助手 (00326828)

Research Products

[Publications] Okada, T., et al.: "AAV mediated gene transfer for gene therapy of ischemia-induced neuronal death"Method. Enzymol.. 346. 378-393 (2002)

[Publications] Okada, T., et al.: "Development and characterization of an antisense-mediated. regulation system for adeno-associated virus vector production with introduction of Cre recombinase"Biochem. Biophys. Res. Comm.. 288. 62-68 (2001)

[Publications] Okada, T., et al.: "AV. TK-mediated killing of subcutaneous tumors in situ results in effective immunization against established secondary intracranial tumor deposits"Gene Ther.. 8. 1315-1322 (2001)

[Publications] Muramatsu, M., et al.: "Reversible Integration of the Dominant Negative Retinoid Receptor Gene for ex Vivo Expansion of Hematopoietic Stem/Progenitor Cells"Biochem. Biophys. Res. Comm.. 285. 891-896 (2001)

[Publications] Kanazawa, T., et al.: "Gamma-rays enhance rAAV-mediated transgene expression and cytocidal effect of AAV-HSVtk/ganciclovir on cancer cells"Cancer Gene Ther.. 8. 99-106 (2001)

[Publications] Wang L., et al.: "Delivery of AAV-GDNF prevents nigral neurodegeneration and promotes functional recovery in a rat model of Parkinson's disease"Gene Ther.. (in press).

岡田尚已自治医科大学, 医学部, 助手 (00326828)