象牙芽細胞の細胞膜情報伝達系と細胞機能-容量性Ca^<2+>流入チャネルに着目して-

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13771103
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Research Institution: Tokyo Dental College
• Principal Investigator: 澁川 義幸 東京歯科大学, 歯学部, 助手 (30276969)
• Keywords: 象牙芽細胞 / 容量性カルシウム流入 / 容量性カルシウム流入チャネル / 歯髄 / パッチクランプ法 / イノシトール3燐酸受容体 / 細胞内カルシウムイオン濃度 / 細胞内カルシウムストア

Research Abstract

象牙芽細胞の容量性Ca^<2+>流入チャネルに着目し、象牙質形成に関わる神経制御機構を検索した。
1.象牙芽細胞における容量性Ca^<2+>流入の電気生理学的・薬理学的特性を細胞内Ca^<2+>濃度計測およびパッチクランプ法を用いて解析した。
(1)象牙芽細胞に以下の特性を示す容量性Ca^<2+>流入チャネルが発現していた。
a.細胞内Ca^<2+>ストアの枯渇で活性化する。
b.過分極電位における内向き整流特性、陽性反転電位、電位非依存性活性化、Ca^<2+>>Ba^<2+>【approximately equal】Sr^<2+>>>Mn^<2+>の相対的コンダクタンスを示す。
c.細胞外La^<3+>で濃度依存的に抑制される(IC_<50>=26μM)。
d.Ca^<2+>選択性(K_D=1.29mM;Hill coefficient=1.4)を示す。
e.膜透過性IP_3受容体抑制薬2-aminoethoxydiphenyl borateで抑制される。
(2)象牙芽細胞に、muscarinic、bradykinin、P2Y受容体が発現していた。
(3)象牙芽細胞に、IP_3感受性Ca^<2+>ストアからのCa^<2+>放出(IP_3誘発性Ca^<2+>放出)機構が発現していた。
以上のことから、歯髄内で放出される神経性・化学性因子が象牙芽細胞のフォスフォリパーゼC関連受容体を活性化し、IP_3誘発性Ca^<2+>放出を引き起こす結果、ストアが枯渇し、容量性Ca^<2+>流入チャネル(store-operated Ca^<2+> channels)が活性化する事が示された。容量性Ca^<2+>流入は、象牙芽細胞の細胞内Ca^<2+>シグナルとして象牙芽細胞機能を調節する結果、象牙質形成を駆動していると考えられる。
本成果は、International Conference on Dentin/Pulp Complex 2001においてYoung Investigator Awardを受賞した。

Research Products

• [Publications] Shibukawa Y: "Calcium Signaling Mediated by IP_3 -Sensitive Ca^<2+> Stores in Odontoblasts:-Store-Operated Ca^<2+> Channels and Autonomic Regulation-"Proceedings for the International Conference on Dentin/Pulp Complex 2001. (In Press). (2002)
• [Publications] Shibukawa Y: "IP_3 Receptor-Sensitive Ca^<2+> Release and Store-Operated Ca^<2+> Channels in Odontoblasts"Journal of Dental Research. 81(Sepec Iss)(In Press). (2002)