2002 Fiscal Year Annual Research Report

骨血管内皮細胞を介した破骨細胞形成誘導機構の解析

Research Project

Project/Area Number	13771373
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	藤田直也東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助手 (20280951)
Keywords	骨転移 / 血管内皮細胞 / TGF-β / RANKL / プロモーター解析
Research Abstract	骨微小環境における細胞間相互作用は、骨代謝において重要な役割を担っている。現在までに多くの可溶性因子が同定されているが、細胞接着に関わる因子も破骨細胞の分化制御に重要であることが示唆されていた。この細胞接着に関わる因子として近年同定された破骨細胞分化因子(RANKL)は、破骨細胞前駆細胞上のRANKと結合することにより破骨細胞前駆細胞を破骨細胞へと分化・成熟させることが明らかとなっている。RANKLは骨代謝または過度な骨吸収領域に存在する骨芽細胞や骨ストローマ細胞において高発現していることが明らかとなっているが、先に我々が見いだした骨血管内皮細胞による破骨細胞の分化における役割は明らかではなかった。そこで本申請課題により樹立した骨由来血管内皮細胞を用いてRANKLの発現を検討した結果、TGF-βなど骨吸収を誘導する因子依存的にRANKL mRNA・蛋白質の発現が増大することを見い出した。このようなRANKLの発現誘導は、p38MAPKの阻害剤やPKAの阻害剤、Dominant-negative CREBの遺伝子導入によって阻害されたことから、血管内皮細胞におけるRANKLの発現にはp38MAPKとPKAの下流に位置するCREBやATF-2などCRE-like domainに結合する転写因子が関わっていることが示唆された。そこでRANKLのプロモーター領域を用いたレポーターアッセイによりTGF-β依存的なRANKL発現に必須なドメインとして、RANKL遺伝子上流-945から-926のCRE-like domainを同定した。さらに、EMSA法により、TGF-β依存的に転写因子がこのCRE-like domainに結合することを確認できた。以上の結果より、血管内皮細胞もRANKL発現を介して破骨細胞の分化・成熟に寄与している分子機構が明らかになった。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] 石田敦士: "Transforming growth factor-β induces expression of receptor activator of NF-κB ligand in vascular endothelial cells derived from bone"J. Biol. Chem.. 277. 26217-26224 (2002)
[Publications] 藤田直也: "Akt-dependent phosphorylation of p27^<Kip1> promotes binding to 14-3-3 and cytoplasmic localization"J. Biol. Chem.. 277. 28706-28713 (2002)
[Publications] 藤田直也: "Involvement of Hsp90 in signaling and stability of 3-phosphoinositide-dependent kinase-1"J. Biol. Chem.. 277. 10346-10353 (2002)
[Publications] 六代範: "Involvement of FKHR-dependent TRADD expression in chemotherapeutic drug-induced apoptosis"Mol. Cell. Biol.. 22. 8695-8708 (2002)
[Publications] 佐藤沙織: "Regulation of kinase activity of 3-phosphoinositide-dependent kinase-1 by binding to 14-3-3"J. Biol. Chem.. 277. 39360-39367 (2002)
[Publications] 佐藤沙織: "Interference with PDK1-Akt survival signaling pathway by UCN-01 (7-hydroxystaurosporine)"Oncogene. 21. 1727-1738 (2002)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

骨血管内皮細胞を介した破骨細胞形成誘導機構の解析

Principal Investigator

藤田 直也 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助手 (20280951)

Research Products

[Publications] 石田 敦士: "Transforming growth factor-β induces expression of receptor activator of NF-κB ligand in vascular endothelial cells derived from bone"J. Biol. Chem.. 277. 26217-26224 (2002)

[Publications] 藤田 直也: "Akt-dependent phosphorylation of p27^<Kip1> promotes binding to 14-3-3 and cytoplasmic localization"J. Biol. Chem.. 277. 28706-28713 (2002)

[Publications] 藤田 直也: "Involvement of Hsp90 in signaling and stability of 3-phosphoinositide-dependent kinase-1"J. Biol. Chem.. 277. 10346-10353 (2002)

[Publications] 六代 範: "Involvement of FKHR-dependent TRADD expression in chemotherapeutic drug-induced apoptosis"Mol. Cell. Biol.. 22. 8695-8708 (2002)

[Publications] 佐藤 沙織: "Regulation of kinase activity of 3-phosphoinositide-dependent kinase-1 by binding to 14-3-3"J. Biol. Chem.. 277. 39360-39367 (2002)

[Publications] 佐藤 沙織: "Interference with PDK1-Akt survival signaling pathway by UCN-01 (7-hydroxystaurosporine)"Oncogene. 21. 1727-1738 (2002)

藤田直也東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助手 (20280951)

[Publications] 石田敦士: "Transforming growth factor-β induces expression of receptor activator of NF-κB ligand in vascular endothelial cells derived from bone"J. Biol. Chem.. 277. 26217-26224 (2002)

[Publications] 藤田直也: "Akt-dependent phosphorylation of p27^<Kip1> promotes binding to 14-3-3 and cytoplasmic localization"J. Biol. Chem.. 277. 28706-28713 (2002)

[Publications] 藤田直也: "Involvement of Hsp90 in signaling and stability of 3-phosphoinositide-dependent kinase-1"J. Biol. Chem.. 277. 10346-10353 (2002)

[Publications] 六代範: "Involvement of FKHR-dependent TRADD expression in chemotherapeutic drug-induced apoptosis"Mol. Cell. Biol.. 22. 8695-8708 (2002)

[Publications] 佐藤沙織: "Regulation of kinase activity of 3-phosphoinositide-dependent kinase-1 by binding to 14-3-3"J. Biol. Chem.. 277. 39360-39367 (2002)

[Publications] 佐藤沙織: "Interference with PDK1-Akt survival signaling pathway by UCN-01 (7-hydroxystaurosporine)"Oncogene. 21. 1727-1738 (2002)