ファイバーミュータントアデノウイルスベクターによる樹状細胞への効率的な遺伝子導入

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13771394
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Research Institution: Kyoto Pharmaceutical University
• Principal Investigator: 岡田 直貴 京都薬科大学, 薬学部, 助手 (90312123)
• Keywords: 樹状細胞 / アデノウイルスベクター / 癌免疫療法 / ファイバーミュータント / 遺伝子導入効率

Research Abstract

補助金交付を受けた平成13年度の研究により、以下の3点に関する新たな知見を得た。
1.マウス樹状細胞(DC)株およびヒト正常DCにおけるアデノウイルス受容体の発現
RT-PCR解析により、マウスDC株およびヒト正常DCにおいてはcoxsackie-adenovirus receptor(CAR)mRNAの発現が極めて低いあるいは欠損していることが明らかとなった。一方、α_vβ_3あるいはα_vβ_5インテグリンのmRNA発現は十分に認められた。本結果は、DCのAd遺伝子導入に対する抵抗性がCARの低発現に起因すること、ならびにAdの標的指向性をα_vインテグリンに改変することでDCへの効率的な遺伝子導入が達成できることを示している。
2.RGDファイバーミュータントアデノウイルスベクター(RGD-Ad)によるマウスDC株およびヒト正常DCへの遺伝子導入・発現効率
マウスDC株およびヒト正常DCにレポーター遺伝子を搭載したRGD-Adあるいは従来型Adを感染させ、2日後に遺伝子導入・発現効率を評価した。従来型Adと比較してRGD-Adは極めて効率良くDCへの遺伝子導入・発現を達成できた。
3.RGD-Adによりニワトリ卵白アルブミン(OVA)遺伝子を導入したDC2.4細胞(マウスDC株)の免疫学的機能
RGD-AdによりOVA遺伝子を導入したDC2.4細胞では、従来型Adを適用した場合と比較して、高い抗原提示能・OVA特異的CTL誘導能あるいは抗E.G7-OVA腫瘍効果を示した。また、OVA発現RGD-Adを感染させたDC2.4細胞では、MHC分子および共刺激分子の発現増強ならびにIL-12産生増強が認められ、成熟傾向にあることが判明した。
以上の知見から、DC免疫療法におけるRGD-Adの有用性が示され、今後、RGD-Adを用いて種々の遺伝子修飾を施したDCによる新規免疫療法の開発を試みる予定である。

Research Products

• [Publications] Naoki Okada et al.: "Efficient antigen gene transduction using Arg-GIy-Asp fiber-mutant adenovirus vectors can potentiate anti-tumor vaccine efficacy and maturation of murine dendritic cells"Cancer Research. 61. 7913-7919 (2001)
• [Publications] Naoki Okada et al.: "Effects of lipofectin-antigen complexes on major histocompatibility complex class I-restricted antigen presentation pathway in murine dendritic cells and on dendritic cell maturation"Biochimmica et Biophysica Acta.. 1527. 97-101 (2001)
• [Publications] Naoki Okada et al.: "Administration route-dependent vaccine efficiency of murine dendritic cells pulsed with antigens"British Journal of Cancer. 84. 1564-1570 (2001)
• [Publications] Naoki Okada et al.: "Efficient gene delivery into dendritic cells by fiber-mutant adenovirus vectors"Biochemical and Biophysical Research Communications. 282. 173-179 (2001)
• [Publications] 岡田直貴: "ファイバーミュータントアデノウイルスベクターを用いた樹状細胞への効率的な遺伝子導入"薬学雑誌. 121. 593-600 (2001)