2004 Fiscal Year Annual Research Report
植物ウイルスのゲノム複製装置の分子解剖と無細胞ウイルス複製系の開発に関する研究
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13854004
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| Research Institution | Tamagawa University |
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Principal Investigator |
日比 忠明 玉川大学, 学術研究所, 教授 (50261954)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
難波 成任 東京大学, 大学院・新領域創成科学研究科, 教授 (50189221)
白子 幸男 東京大学, アジア生物資源環境研究センター, 教授 (90143023)
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| Keywords | 植物ウイルス / RNA複製 / DNA複製 / 宿主タンパク質 / TMV / SbCMV / AGSV / SBWMV |
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| Research Abstract |
1.タバコの翻訳伸長因子eEF1Aは、TMVゲノムRNAの3'非翻訳領域(UTR)ならびにTMV RdRpに直接結合し、さらに本タンパク質の発現抑制によってTMVの増殖が阻害され、逆にその過剰発現によってTMVの増殖が促進されることから、eEF1AがTMVゲノム複製複合体の必須の構成成分であることが示された。
2.TMV RdRpのPドメインと結合するタバコのPHF15タンパク質はRdRpのヘテロダイマー形成を阻害し、さらに本タンパク質の発現抑制によってTMVの増殖が促進され、逆にその過剰発現によってTMVの増殖が阻害されることから、PHF15はTMV RNA複製の阻害因子であることが示された。
3.PotexvirusとCapillovirusの病徴決定因子の特定、およびそれに関与する複製・移行因子の探索を行った。病徴型の異なるPotexvirusの系統を用いて解析を行った結果、Potato virus Xの病徴決定に関わるウイルス側因子が、5'非翻訳領域およびRdRpにあることを明らかにした。また、細胞間移行タンパク質(TGBp/MP)と結合する植物側因子を酵母two-hybrid法によってスクリーニングした結果、PotexvirusのTGBp2とankyrin-repeat domain containing protein(ARD)が結合することを見いだした。CapillovirusのMPはARDと結合しないことを確認し、細胞間移行タンパク質のタイプにより、関与する植物側因子の異なることが示された。
4.ムギ類萎縮ウイルスのp37移行タンパク質、CP、CPリードスルータンパク質および機能未知のp19タンパク質のRNA複製における機能を比較した。p37とCP関連タンパク質はウイルスRNAの複製に影響しなかったが、p19非発現下では感染24時間後以降のウイルスRNA蓄積量が顕著に減少した。p19を異種ウイルスのRNAサイレンシング抑制因子(RSS)遺伝子と置換したところ、PotyvirusのHC-Proは感染初期から阻害的に働いたが、Hordeivirusのγb、Tenuivirusのp5およびTombusvirusのp19は補完的に機能し、RSSの属特異性と作用点の微妙な違いが示された。
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Research Products
(5 results)
