分子生物学的手法を用いた環境発がん物質による毒性発現機構の解析

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13877053
• Research Institution: 佐賀医科大学
• Principal Investigator: 友国 勝麿 佐賀大学, 医学部, 教授 (40032891)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 市場 正良 佐賀大学, 医学部, 助教授 (60184628)
• Keywords: 環境発がん / 多環芳香族炭化水素 / DNA損傷 / DNA付加体 / 8-OH d G / 1-ヒドロキシピレン / 分子疫学

Research Abstract

ディーゼルエンジンの排ガスやコークス炉ガス中に含まれる多環芳香族炭化水素(PAH)の多くはヒトに対して発がん性のあることが知られているが,その分子機構並びに量・反応関係に関しては不明の点が多い.本研究では,PAHへの暴露が比較的高いと思われる,某製鉄所のコークス炉作業者(約160名)を対象群に,一般作業者(約60名)をコントロール群に設定し,インフォームドコンセントを得た上で両群より少量の末梢血及びスポット尿を採取した.末梢血からは速やかにリンパ球DNAを抽出し,スポット尿と共に超低温フリーザーに保存した.これらのサンプルを適宜解凍して,PAH暴露によるDNA損傷の程度を2つのBiomarkerを用いて解析した.即ち,PAHの中間代謝物とDNA塩基との共有結合により生じるリンパ球DNA付加体量を32Pポストラベリング法により,酸化的DNA損傷の指標である8-OH d G量をECD-HPLC法により,それぞれ測定し,両者の関係を比較検討した.また,PAH暴露総量の目安として,尿中1-ヒドロキシピレン量を蛍光HPLC法により測定した.その結果,暴露群と対照群の間では,DNA付加体量,8-OH d G量及び尿中1-ヒドロキシピレン量において有意差が認められた.しかし,特に暴露群において,総暴露量の目安である尿中1-ヒドロキシピレン排泄量とリンパ球DNA付加体量との相関関係を解析すると,弱い正の相関しか認められなかった.同様に,リンパ球の8-OH d Gレベルとの間にも弱い相関しか認められなかった.更に,DNA付加体と8-OH d Gの間にも有意の相関は認められなかった.
これらの結果から,発がんリスクの解析に最適なDNA損傷のBiomarkerを見出すためには,分析法を含めた更なる検討が必要である,

Research Products

• [Publications] Ichiba M: "Lymphocyte DNA adducts and polymorphism in the DNA repair enzyme XPD"Biomarkers. 6(4). 289-293 (2001)
• [Publications] Zhang J: "Urinary 1-hydroxypyrene in coke oven workers relative to exposure, Alcohol consumption, and metabolic enzymes"Occupational and Environmental Medicine. 58(11). 716-721 (2001)
• [Publications] Hanaoka T: "Cytochrome P4501B1 mRNA levels in peripheral blood cells and exposure To polycyclic aromatic hydrocarbons in Chinese coke oven workers"The Science of the Total Environment. 296. 27-33 (2002)
• [Publications] Lee J: "Influence of GSTM1 genotype on association between aromatic DNA adducts and urinary PAH metabolites in incineration workers"Mutation Research. 514. 213-221 (2002)
• [Publications] Zhang J: "Leukocyte 8-hydroxydeoxyguanosine and aromatic DNA adduct in coke oven workers with polycyclic aromatic hydrocarbon exposure"International Archives of Occupational and Environmental Health. 76. 499-504 (2003)
• [Publications] Lee KH: "Multiple biomarkers study in painters in a shipyard in Korea"Mutation Research. 540. 89-98 (2003)