ADAMTSによるアミロイド前駆体蛋白のプロセッシングと細胞外基質への影響

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13877097
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 廣畑 聡 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (90332791)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 米澤 朋子 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (30304299) ; 大橋 俊孝 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 講師 (50194262) ; 二宮 善文 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (70126241) ; 百田 龍輔 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (80263557)
• Keywords: ADAMTS / 細胞外マトリックス

Research Abstract

ADAMファミリーのうち、ADM-10とADAM-17はαセクレターゼ機能を持つことが知られているが、ADAMTSが同様な機能を持つか検討した。
まず、基礎的実験としてADAMTS-1はその遺伝子発現がリポポリサッカライド刺激により、各臓器において発現が上昇することから炎症において何らかの役割を持つことが示唆されている。そこで、ラット実験的心筋梗塞モデルを用いてADAMTS-1の発現形式をノーザンブロット法にて検討した。ADAMTS-1は非梗塞心臓では弱い発現しか認めなかったが、梗塞心においては、梗塞後6時間でその発現が大きく上昇していた。
マウス脳におけるADAMTSの発現をADAMTS-1〜7において検討したが、いずれもそれほど強くなかった。海外共同研究として、アミロイド前駆体蛋白を強制発現し、恒常的に発現する細胞株を樹立している、アラバマ大学Fukuchi教授らと共同実験を開始した。同細胞株は、通常の神経系細胞よりも過剰にアミロイド前駆体蛋白を発現している。これまでの検討によって過剰なアミロイド蛋白前駆体が細胞表面及び培養上清中に存在することが確認された。この実験系において過剰なアミロイド前駆体の切断がαセクレターゼによって制御されているかどうかを検討する目的でこの細胞系におけるαセクレターゼ発現の検討を開始した。実験の条件検討が複雑であり、切断の確認は困難であった。今後は、In vivoの系における実験系の確立およびアルツハイマー脳におけるADAMTSの発現解析が重要と考えられた。

Research Products

• [Publications] Takemoto S: "Increased expression of dermatopontin mRNA in the infarct zone of experimentally induced myocardial infarction in rats: comparison with decorin and type I collagen mRNAs"Basic Research in Cardiology. 97(6). 461-468 (2002)
• [Publications] Komata T: "Caspase-8 gene therapy using the human telomerase reverse transcriptase promoter for malignant glioma cells"Hum Gene Ther. 13(9). 1015-1025 (2002)
• [Publications] Hirohata S: "Punctin, a novel ADAMTS-like molecule (ADAMTSL-1) in extracellular matrix"J Biol Chem. 277(14). 12182-12189 (2002)
• [Publications] Hirohata S: "ADAMTS family--new extracellular matrix degrading enzyme"Seikagaku. 73(11). 1333-1337 (2001)
• [Publications] Ayada Y: "Increased expression of biglycan mrna in pressure-overloaded rat heart"Clin Exp Hypertens. 23(8). 633-643 (2001)
• [Publications] Fernandes RJ: "Procollagen II Amino Propeptide Processing by ADAMTS-3. INSIGHTS ON DERMATOSPARAXIS"J Biol Chem. 276(34). 31502-31509 (2001)
• [Publications] Komada T: "FADD gene transfer under the control of the human telomerase reverse transcriptase gene promoter"Int J Oncol. 19(5). 1005-1020 (2001)
• [Publications] Komada T: "Treatment of malignant glioma cells with the transfer of constitutively active caspase-6 using the human telomerase catalytic subunit (human telomerase reverse transcriptase) gene promoter"Cancer Res. 61(15). 5796-5802 (2001)
• [Publications] Koga S: "FADD gene therapy using the human telomerase catalytic subunit (hTERT) gene promoter to restrict induction of apoptosis to tumors in vitro and in vivo"Anticancer Res. 21(3B). 1937-1943 (2001)