白血病診断用独自作製DNAチップを用いた新規遺伝子の機能スクリーニング

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13877157
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 佐藤 武幸 千葉大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (30187207)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 関 直彦 千葉大学, 大学院・医学研究院, 助教授
• Keywords: DNAチップ / 白血病 / 造血幹細胞

Research Abstract

我々は、ALLとAMLを識別する50の遺伝子(Science 286:531-537,1999)を含み、さらに種々の細胞表面抗原遺伝子、薬剤耐性遺伝子、癌遺伝子・癌抑制遺伝子、白血病細胞内薬剤代謝関連遺伝子(薬剤の活性化および不活化)、転写因子関連遺伝子、シグナル伝達系関連遺伝子、接着因子関連遺伝子、アポトーシス関連遺伝子、ホメオボックス関連遺伝子、Polycomb・Trithrax関連遺伝子および種々の機能不明の新規遺伝子を加えたDNAチップを独自作製し、白血病患者10名の初発時白血病細胞、血球系細胞株CMK,CMSについて遺伝子発現を検討した。
CMK,CMS細胞は共に巨核球系細胞株であるが、前者は分化型であり後者は未分化型である。両者の比較により、proteoglycan-1,annexin V,vimentin等合計11種の遺伝子が分化関連遺伝子としてスクリーニングされ、検討をすすめている。
初発時白血病細胞は、頻回の検討を可能にするため、T7プロモーターを利用した系によりRNAを増幅した。ALLとAMLを識別する50の遺伝子以外にも、発現に差のある遺伝子がスクリーニングされており、リンパ系と骨髄系の分化との関連で検討をすすめている。
造血幹細胞とし、CD34陽性かつCD38陰性細胞は、CD34陽性かつCD38陽性細胞と比しより未分化とされている。臍帯血よりMACS社の磁気ビーズを用い両者を分離し、増幅後両者の発現を検討し、複数の遺伝子をスクリーニングした。現在分化との関連で、これら遺伝子の機能を検討中である。

Research Products

• [Publications] Manabe, A.et, al.: "Delay of the diagnostic lumbar puncture and intrathecal chemotherapy in children with acute lymphoblastic leukemia who undergo routine corticosteroid testing"J.Clin.Oncol.. 19. 3182-3187 (2001)
• [Publications] Fuse, A.et, al.: "Effect of gravity change on thrombopoiesis in mice"J.Grav.Physiol.8,63-64.. 8. 63-64 (2001)
• [Publications] 佐藤武幸, 外: "白血病の分類-DNAマイクロアレイ/DNAチップ"小児科診療. 65. 201-206 (2002)