エンドトキシン耐性誘導による外科的侵襲反応の軽減―交感神経及び細胞内cAMPの関与

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13877181
• Research Category: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 三村 芳和 東京大学, 医学部・附属病院, 助教授 (10175614)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 比企 直樹 東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (30313026) ; 小川 利久 東京大学, 医学部・附属病院, 講師 (80224111)
• Keywords: エンドトキシン耐性 / 交感神経 / カテコラミン / LPS / サイトカイン / 手術侵襲

Research Abstract

実験1.Endotoxin toletance(ExT)誘導における交感神経系の関与
ExT誘導に交感神経系が関与するという先のラットのin vivo実験を発展させ,このことが細胞レベルでも認められるかどうか,RAW264cell lineを用いて調べた.
1)細胞にLPS10ngを加えて24時間培養した(LPS前投与)後,LPS100ngに暴露すると,Saline前投与と比鮫して培養液中のTNFα,IL-6濃度は減少し,ExTが成立した.
2)細胞にカテコラミンを加えてLPS前投与を行うと,ExT誘導が促進した.
3)LPS前投与にさらにβ-blockerを加えるとExTの誘導が低下した.
4)IL-10漉度はすべての群で測定感度以下であった.
結論:1)ExT誘導に交感神経系はβ受容体を介して関与している;2)IL-10の関与はない.
実験2.ExT誘導による手術侵襲反応軽減の試み
ExTを誘導することにより手術侵襲反応を軽減することが出来るか,ラットで調べた.
Wistar系雄性ラットを用いて,LPSを2日間,腹腔内投与し,ExTを誘導した(LPS群).LPSの代わりに生理食塩水を投与したラツトをSal群とした.この方法でExTが誘導されるのを確認した(TNFα産生抑制を指標)うえで,上記の2群を手術侵襲の有無でさらに2つに分けた.最初のLPS投与から5日目に頚静脈カニュレーションと開腹,腎切開縫合術をおこなった.カニュレーションのみを行った群をSham群とした.侵襲度(血漿IL-6, AST濃度)と蛋白代謝(手術後7日間にわたる窒素平衡)の評価をした.
1)手術侵襲により増加した血漿IL-6濃度,AST濃度は,LPS前投与で減少した.
2)手術侵襲で窒素平衡は明らかに不良となったが,LPS前投与により改善した.
結論:ラットにおいてExと手術侵襲とは交叉耐性をおこす.