エナメル上皮幹細胞の多能性の検討

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13877308
• Research Category: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• Research Institution: Kyushu Dental College
• Principal Investigator: 原田 英光 九州歯科大学, 歯学部, 助教授 (70271210)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 豊野 孝 九州歯科大学, 歯学部, 助手 (10311929) ; 豊島 邦昭 九州歯科大学, 歯学部, 教授 (10112559)
• Keywords: 幹細胞 / マウス / 切歯 / 線維芽細胞増殖因子-10 / エナメル上皮 / 再生 / 多能性

Research Abstract

(1)ラット切歯成長端から作製した細胞株HAT-7の特性を検討した.HAT-7は,サイトケラチン14に陽性であり,培養条件がコンフルエントになるとアメロゲニンを発現する細胞とアルカリフォスファターゼを発現する細胞が出現することを免疫組織化学的検索とウエスタンブロット法並びにRT-PCRによって示した.以上の結果から,HAT-7はエナメル芽細胞の分化のリニエージをもった細胞であることが確認できた.(2)HAT-7の分化の多様性に関する検討.この細胞株にGFP発現ベクターを遺伝子導入してGFP発現細胞を作製した.これを腎臓に移植して細胞の変化を観察したが,腎臓の尿細管細胞の自家蛍光とGFPを明瞭に区別できなかった.そのため,HAT-7の細胞の形質変化を観察できなかったので,新たに現在βガラクトシダーゼ発現細胞を作製中である.この細胞を用いて腎臓,肝臓,肺,唾液腺等に移植して,HAT-7が他の組織の細胞に分化させることが可能かを検討する.(3)また,来年度は細胞株を用いず,ラット切歯成長端のサービカルループの一次培養細胞に上記と同様,βガラクトシダーゼ発現遺伝子を導入し,移植実験を試みる予定である.これらの結果を踏まえて,エナメル上皮幹細胞の多能性について検討する.(4)ラット切歯の幹細胞以外に,臼歯歯堤細胞からエナメル上皮幹細胞を分離培養する方法も検討しているので,これらの細胞の分化の多能性についても調べていく予定である.

Research Products

• [Publications] Hidemitsu Harada: "FGF10 maintains stem cell compartment in developing mouse incisor"Development. (in press).
• [Publications] Hidemitsu Harada: "FGF10 maintain stem cell population during mouse incisor development"Connective Tissue Research. (suppl)(in press).
• [Publications] Shintaro Kawano: "Establishment of dental epithelial cell line (HAT-7) and the cell-differentiation depend on Notch signaling pathway"Connective Tissue Research. (suppl)(in press).
• [Publications] Hidemitsu Harada: "Epithelial stem cells in teeth"Odontology. (in press).
• [Publications] 原田 英光: "歯の再生"再生医学・再生医療・現代化学増刊. (in press).