Ｈｉｐｐｏシグナル経路による細胞間コミュニケーションの解析

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13J01059
• Research Institution: Kumamoto University
• Principal Investigator: 加村 啓一郎 熊本大学, 発生医学研究所, 特別研究員(PD)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: Hippoシグナル / 細胞間コミュニケーション / 発生

Outline of Annual Research Achievements

今年度は、前年度に引き続き、モザイク胚において、細胞競合が生じるメカニズムを明らかにすること、に取り組んできた。具体的には、薬剤（タモキシフェン）誘導型のCre/loxPシステムを利用し、導入遺伝子の発現細胞をモザイク状にもつ胚（モザイク胚）を作製した。導入遺伝子として、Rosa26遺伝子座から、Tead活性化型もしくはTead不活性化型をGFPと共に発現誘導し、さらに、正常細胞の指標とするため、同じ遺伝子座から核移行型mCherryを発現誘導した。実際には、これらのマウス胚（E7.5）を培養下で薬剤誘導して、モザイク胚を作製し、共焦点顕微鏡を用いて２４時間程度のタイムラプス・ライブイメージングをおこなった。
その結果、Tead 活性化型、不活性化型共に、Tg細胞が出現するタイミングが、正常細胞に比べて遅く、誘導直後からTg細胞が排除されていることが予想された。そこで、誘導直後の胚をより詳細に観察していくと、細胞が断片化されて、組織内に取り込まれていくような現象が複数観察された。
また、遅いながらも出現してきたTg細胞が、その後どのような運命をたどるのか（排除されるのか否か）を確認するために、誘導4日後の胚（E6.5で薬剤投与し、E10.5で固定）でもTg細胞と正常細胞の割合を観察した。現在のところ予備的な結果ではあるが、Tg細胞の存在がある程度認められており、必ずしも全てのTg細胞が排除されるわけではないことが確認できた。このことから、研究計画で提案してきた、異質なものもある程度は許容する「細胞協調」の仕組みが備わっていることが示唆された。

Research Progress Status

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

26年度が最終年度であるため、記入しない。