2014 Fiscal Year Annual Research Report
破骨細胞における新規小胞輸送遺伝子群の同定とその機能
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13J10718
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
菅原 めぐみ 長崎大学, 医歯薬学総合研究科歯学系, 特別研究員(DC2)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 破骨細胞 / Rab27A / 多核化 / lysosome |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、ﾏｸﾛﾌｧｰｼﾞから破骨細胞への分化過程において、mRNAﾚﾍﾞﾙが発現上昇する遺伝子の１つとしてRab27Aを同定し、破骨細胞におけるLROs形成とその他の機能に関する解析を行った。DNAﾏｲｸﾛｱﾚｰ解析を行い、破骨細胞分化過程で発現ﾚﾍﾞﾙが上昇する遺伝子としてRab27A遺伝子を同定した。RANKL刺激して破骨細胞分化を誘導すると、Rab27AをﾉｯｸﾀﾞｳﾝしたRAW-D細胞ではｺﾝﾄﾛｰﾙに比べ、細胞の多核化と巨大化を示した。同様に、Rab27A遺伝子変異を持つAshenﾏｳｽ由来のﾏｸﾛﾌｧｰｼﾞを培養すると、多核化と巨大化が観察された。破骨細胞のﾏｰｶｰ遺伝子の発現ﾚﾍﾞﾙを比較すると、野生型に比べてAshen破骨細胞では種々のそれが有意に上昇していた。Ashen破骨細胞が多核化と巨大化される分子ﾒｶﾆｽﾞﾑとして、同細胞では受容体の輸送異常とその下流ｼｸﾞﾅﾙの増強が観察された。Ashen破骨細胞では、M-CSFとRANKL刺激に対して、Erk、p38、Aktのﾘﾝ酸化ﾚﾍﾞﾙが上昇した。さらに、FACS解析により、M-CSFの受容体であるc-fmsの細胞膜の発現レベルがAshen破骨細胞では高くなることが分かった。またRANKLの受容体であるRANKは受容体のﾀﾞｳﾝﾚｷﾞｭﾚｰｼｮﾝが異常になっており、細胞内に長く留まっていた。Ashen破骨細胞では、細胞内で形成されるLROsの輸送が異常になっていた。野生型とAshen破骨細胞を比較すると、Ashen破骨細胞では、骨吸収に重要なactin ringの形成が異常になっており、ﾘｿｿｰﾑﾀﾝﾊﾟｸ質であるLAMP2、あるいはｶﾃﾌﾟｼﾝKの局在が異常になっていた。またashen破骨細胞では、種々のﾘｿｿｰﾑﾀﾝﾊﾟｸ質の量が異常になっていることや、骨吸収能が有意に低下していることが分かった。
Shimada-Sugawara M et al.scientific reports,2015.in press.
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| Research Progress Status |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(3 results)
