2003 Fiscal Year Annual Research Report

ASK1の活性化機構の解明と機能解析

Research Project

Project/Area Number	14086204
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	武田弘資東京大学, 大学院・薬学系研究科, 講師 (10313230)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	一條秀憲東京大学, 大学院・薬学系研究科, 教授 (00242206)
Keywords	ストレス / シグナル伝達 / MAPキナーゼ / アポトーシス
Research Abstract	本研究では酵母Two-hybrid法を用いたASK1結合タンパク質の検索を進めているが、新たなASK1結合分子としてFas-activated Serine/Threonine Kinase(FastK)を同定した。FastKは当初、Fasによるアポトーシスに関わるセリン/スレオニンキナーゼとして報告された。HEK293細胞にFastKとASK1を共発現させるとASK1 Thr845のリン酸化レベルが上昇した。キナーゼとしての構造を保持できない変異型FastKとの共発現によってもASK1のリン酸化レベルが上昇すること、またin vitro kinase assayによってFastKのキナーゼ活性が検出できなかったことから、FastKはキナーゼとして直接ASK1をリン酸化して活性化するのではなく、間接的にASK1のリン酸化を誘導することでASK1を活性化するものと考えられる。また、FastKの過剰発現によりJNKおよびp38の活性化が認められ、さらにCaspase-3の活性化を伴う細胞死が誘導された。以上の結果から、FastKは、ASK1の活性化を介して新たなMAPキナーゼ系の制御因子として機能し、アポトーシスの制御にも関わる分子であることが示唆された。このように引き続きいくつかのASK1結合タンパク質の機能解析を行う一方、ASK1の活性化機構を詳細に検討するための実験系の確立を試みた。細胞抽出液をゲル濾過カラムクロマトグラフィーにて分画すると、内在性のASK1は非常に高分子の複合体を形成しており、その複合体内において、ASK1が活性化刺激の種類に応じて互いに異なった様式でリン酸化制御されうることを示唆する結果が得られた。この系を用いてASK1活性化の機構とASK1結合分子との関係をより詳細に検討していきたいと考えている。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Takeda, K. et al.: "Involvement of ASK1 in Ca^<2+> -induced p38 MAP kinase activation."EMBO rep.. 5. 161-166 (2004)
[Publications] Takeda, K. et al.: "Roles of MAPKKK ASK1 in Stress-Induced Cell Death."Cell Struct Funct.. 28. 23-29 (2003)
[Publications] Yamaguchi, O. et al.: "Targeted deletion of apoptosis signal-regulating kinase 1 attenuates left ventricular remodeling."Proc Natl Acad Sd USA.. 100. 15883-15888 (2003)
[Publications] Yamagishi, S. et al.: "Apotosis-Signal Regulating Kinase-1 Is Involved in Low Potassium-Induced Activation of p38 Mitogen-Activated Protein Kinase and c-Jun in Cultured Cerebellar Granule Neurons."J.Biochem.. 133. 719-724 (2003)
[Publications] Song, S. et al.: "Essential role of E2-25K/Hip-2 in mediating amyloid-beta neurotoxicity."Mol.Cell. 12. 553-563 (2003)
[Publications] Cho, S.-G.et al.: "Identification of a novel antiapoptotic protein that antagonizes ASK1 and CAD activities."J.Cell Biol.. 163. 71-81 (2003)
[Publications] Matsuzawa, A.et al.: "Signal Transduction by Reactive Oxygen and Nitrogen Species : Pathways and Chemical Principles"Forman, H.J., Fukuto, J. Torres, M.(Kluwer Academic Publishers). 411 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

ASK1の活性化機構の解明と機能解析

Principal Investigator

武田 弘資 東京大学, 大学院・薬学系研究科, 講師 (10313230)

Research Products

[Publications] Takeda, K. et al.: "Involvement of ASK1 in Ca^<2+> -induced p38 MAP kinase activation."EMBO rep.. 5. 161-166 (2004)

[Publications] Takeda, K. et al.: "Roles of MAPKKK ASK1 in Stress-Induced Cell Death."Cell Struct Funct.. 28. 23-29 (2003)

[Publications] Yamaguchi, O. et al.: "Targeted deletion of apoptosis signal-regulating kinase 1 attenuates left ventricular remodeling."Proc Natl Acad Sd USA.. 100. 15883-15888 (2003)

[Publications] Yamagishi, S. et al.: "Apotosis-Signal Regulating Kinase-1 Is Involved in Low Potassium-Induced Activation of p38 Mitogen-Activated Protein Kinase and c-Jun in Cultured Cerebellar Granule Neurons."J.Biochem.. 133. 719-724 (2003)

[Publications] Song, S. et al.: "Essential role of E2-25K/Hip-2 in mediating amyloid-beta neurotoxicity."Mol.Cell. 12. 553-563 (2003)

[Publications] Cho, S.-G.et al.: "Identification of a novel antiapoptotic protein that antagonizes ASK1 and CAD activities."J.Cell Biol.. 163. 71-81 (2003)

[Publications] Matsuzawa, A.et al.: "Signal Transduction by Reactive Oxygen and Nitrogen Species : Pathways and Chemical Principles"Forman, H.J., Fukuto, J. Torres, M.(Kluwer Academic Publishers). 411 (2003)

武田弘資東京大学, 大学院・薬学系研究科, 講師 (10313230)