口腔癌の微小転移機構の解析と分子標的治療による転移阻止

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14207091
• Research Institution: Ehime University
• Principal Investigator: 浜川 裕之 愛媛大学, 医学部, 教授 (20127905)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 中城 公一 愛媛大学, 医学部附属病院, 講師 (90314880) ; 新谷 悟 愛媛大学, 医学部, 助教授 (80294429)
• Keywords: 口腔癌 / 微小転移 / 術中遺伝子診断 / リアルタイムPCR / 分子標的治療 / COX-2阻害剤

Research Abstract

平成15年度は微小転移術中診断システムの開発に成功した。ミニカラムによるmRNA抽出、ライトサイクラーによるキャピラリー内でのRT-PCRにより2時間以内にリンパ節内微小転移の遺伝子診断を可能にした。本システムの利用により臨床的N0症例において微小転移の術中診断が可能となり、不必要な頸部郭清を回避することが可能となった(Hamakawa, et al.: Int J Oral & Maxillofac Surg,2004)。また、in vitro, in vivoの検討により、口腔癌微小転移のリアルタイムPCRには腫瘍マーカーとしてSCCAが優れていることを明らかにした(Onishi et al.:Oncol Rep 2003)。
また、分子標的治療の基礎研究として、Cyclooxygenase-2 (COX-2)阻害剤に着目した。COX-2は口腔癌を含む各種癌において発現が上昇しており,COX-2の発現と放射線治療抵抗性との関係を調べた。8種類の口腔扁平上皮癌細胞株(HSC2,3,4,SCC25,66,111,Ca9-22,NaN2)を用い,Western Blotting法でCOX-2の発現を,コロニー形成法で放射線感受性を検討した。その結果,COX-2の発現と放射線抵抗性との間に相関を認めた(P=0.043)。COX-2高発現株に対してCOX-2選択的阻害剤と放射線を併用した群では,放射線の感受性が増強され、口腔癌における分子標的治療としての可能性が示された。また,当科にて放射線療法主体の術前治療を施行した口腔癌41例でCOX-2の免疫組織化学的検索を行った結果,治療効果との関係において同様の傾向がみられた。すなわちCOX-2発現症例では術前治療に抵抗性のものが多かった(P=0.047)(Terakado, et al.:Oral Oncol,2004)。

Research Products

• [Publications] M.Mihara, S.Shintani, K.Nakashiro, H.Hamakawa: "Flavopiridol, a cyclin dependent kinase (CDK) inhibitor, induces apoptosis by regulating Bcl-x in oral cancer cells."Oral Oncology. 39(1). 49-55 (2003)
• [Publications] Shintani S, Kiyota A, Mihara M, Sumida T, Kayahara H, Nakashiro K, Hamakawa H: "Enhancement of radiosensitivity in head and neck cancer cells by ZD1839 ('Iressa'), a selective epidermal growth factor receptor tyrosinekinase inhibitor."Am J Clin Oncol. 26(5). E150-E156 (2003)
• [Publications] Zen H, Nakashiro K, Shintani S, Sumida T, Aramoto T, Hamakawa H.: "Detection of circulating cancer cells in human oral squamous cell carcinoma."Int J Oncol. 23(3). 605-610 (2003)
• [Publications] S Shintani, C Li, M Mihara, K Nakashiro, Hamakawa H.: "Gefitinib ('Iressa'), an epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor, mediates the inhibition of lymph node metastasis in oral cancer cells."Cancer Lett. 201(2). 149-155 (2003)
• [Publications] S Shintani, C Li, M Mihara, N Terakado, K Nakashiro, Hamakawa H.: "Enhancement of tumor radioresponse by combined treatment with gefitinib (Iressa, ZD1839), an epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor, is accompanied by inhibition of DNA damage repair and cell growth in oral cancer."Int J Cancer. 107. 1030-1037 (2003)
• [Publications] S Shintani, M Mihara, C Li, Y Nakahara, K Nakashiro, Hamakawa H.: "Up-regulation of DNA-dependent protein kinase correlates with radiation resistance in oral squamous cell carcinoma."Cancer Sci. 94. 894-900 (2003)
• [Publications] Nakashiro K, Begum NM, Uchida D, Kawamata H, Shintani S, Sato M, Hamakawa H.: "Thiazolidinediones inhibit cell growth of human oral squamous cell carcinoma in vitro independent of peroxisome proliferator-activated receptor gamma."Oral Oncol. 39(8). 855-861 (2003)
• [Publications] Uchida D, Begum NM, Almofti A, Nakashiro K, Kawamata H, Tateishi Y, Hamakawa H, Yoshida H, Sato M.: "Possible role of stromal-cell-derived factor-1/CXCR4 signaling on lymph node metastasis of oral squamous cell carcinoma."Exp Cell Res. 290(2). 289-302 (2003)
• [Publications] S Shintani, C Li, M Mihara, T Isikawa, M Mihara, K Nakashiro, H Hamakawa.: "Expression of vascular endothelial growth factor A, B, C, and D in oral squamous cell carcinoma."Oral Oncol. 40(1). 13-20 (2004)
• [Publications] H Hamakawa, A Onishi, T Sumida, N Terakado, S Hino, K Nakashiro, S Shintani: "Intraoperative real-time genetic diagnosis for sentinel node navigation surgery."Int J Oral Max-fac Surg. (In press). (2004)
• [Publications] A Onishi, K Nakashiro, M Mihara, T Sumida, H Kawamata, S Shintani, T Aida, T Tachikawa, H Hamakawa.: "Basic and clinical studies on quantitative analysis of lymph node micrometastasis in oral cancer."Oncol Rep. 11(1). 33-39 (2004)
• [Publications] N Terakado, S Shintani, J Yano, C Li, M Mihara, K Nakashiro, Hamakawa H.: "Overexpression of cyclooxygenase-2 is associated with radioresistance in oral squamous cell carcinoma."Oral Oncol.. (In press). (2004)