2002 Fiscal Year Annual Research Report

形質転換困難な植物の遺伝子機能解析のための新規ベクター系の開発

Research Project

Project/Area Number	14360205
Research Institution	Yokohama National University
Principal Investigator	平塚和之横浜国立大学, 大学院・環境情報研究院, 教授 (30202279)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	中村達夫横浜国立大学, 大学院・環境情報研究院, 講師 (50334636) 鈴木匡横浜国立大学, 大学院・環境情報研究院, 助教授 (40282694)
Keywords	生殖細胞形成 / 減数分裂 / 大量解析 / 核移行シグナル / 遺伝子発現制御 / アンチセンス法 / テッポウユリ / シロイヌナズナ
Research Abstract	テッポウユリの雄性配偶体由来cDNAライブラリーを作成し、それらの大量塩基配列解析を行った。その結果、約1000クローンの新規塩基配列を得ることが出来、それらの機能分類と発現解析を試みた。大量サンプルの発現解析にはリバースノーザン法を用いた。その結果、興味深い性状を示す数クローンを同定することが出来た。それらのうち、既知のデータベース中のタンパク質と相同性を示さず、核移行シグナルを持つ4クローンに関して、GFP融合タンパク質としてタマネギ表皮細胞内で発現させたところ、M355とM404の2クローンは核に局在することが判明した。それらの発現は特異的であることから、雄性配偶体形成あるいは減数分裂に関与する、新規な核タンパク質をコードする可能性が示唆された。また、M532がコードするタンパク質は核小体に局在することが判明し、出芽酵母のRfp2タンパク質との相同性から、雄性配偶体形成期に特異的に発現するリボソーム生成関連タンパク質であることが強く示唆された。M532のシロイヌナズナホモログを単離し詳細に調べたところ、それは単一遺伝子で、発現組織特異性を示さなかった。また、アンチセンス法を用いて発現抑制を試みたところ、矮化する植物体が得られた。一方、雌性生殖器官に関しても、テッポウユリを用いて同様にcDNAライブラリーの大量解析を行い、約1000クローンに関して新規な遺伝子配列情報を得ることが出来た。それらの中には予想アミノ酸配列が既知の抗菌性タンパク質と相同性を示すものが多く含まれていたが、機能未知なタンパク質をコードすると考えられるcDNAも大量に得られた。以上を要するに、当初の目標であった、テッポウユリ生殖器官由来cDNAライブラリーの大量塩基配列決定により、重要な新規配列情報を得ることが出来た。また、テッポウユリcDNAライブラリーからLily symptomless virusのcDNAも得られたので、ベクター開発に活用する予定である。

Research Products

(5 results)

All Other

All Publications (5 results)

[Publications] Gun-Aajav Bayarmaa, Kengo Morohashi, Hisabumi Takase, Kazuyuki Hiratsuka: "Identification of novel microsporogenesis-associated genes encoding proteins with a nuclear localization signal"Plant Biotechnology. 20(in press). (2003)
[Publications] Morohashi, K., Minami, M., Takase, H., Hotta, Y., Hiratsuka, K.: "Isolation and characterization of a novel GRAS gene that regulates meiosis-associated gene expression"Journal of Biological Chemistry. (in press). (2003)
[Publications] George, S., Behl, P., deGuzman, R., Lee, M., Rusyniak, S., Hotta, Y., Hiratsuka, K., Takase, H., Hasenkampf, C.: "Dmc1 fluorescent foci in prophase I nuclei of diploid, triploid and hydrid lilies"Choromosoma. 111. 96-105 (2002)
[Publications] Murata, J., Takase, H, Hiratsuka, K.: "Characterization of a novel GT-box binding protein from Arabidopsis"Plant Biotechnology. 19. 103-112 (2002)
[Publications] 平塚和之: "次世代の農薬開発"ソフトサイエンス社. 171-180 (2003)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

形質転換困難な植物の遺伝子機能解析のための新規ベクター系の開発

Principal Investigator

平塚 和之 横浜国立大学, 大学院・環境情報研究院, 教授 (30202279)

Research Products

[Publications] Gun-Aajav Bayarmaa, Kengo Morohashi, Hisabumi Takase, Kazuyuki Hiratsuka: "Identification of novel microsporogenesis-associated genes encoding proteins with a nuclear localization signal"Plant Biotechnology. 20(in press). (2003)

[Publications] Morohashi, K., Minami, M., Takase, H., Hotta, Y., Hiratsuka, K.: "Isolation and characterization of a novel GRAS gene that regulates meiosis-associated gene expression"Journal of Biological Chemistry. (in press). (2003)

[Publications] George, S., Behl, P., deGuzman, R., Lee, M., Rusyniak, S., Hotta, Y., Hiratsuka, K., Takase, H., Hasenkampf, C.: "Dmc1 fluorescent foci in prophase I nuclei of diploid, triploid and hydrid lilies"Choromosoma. 111. 96-105 (2002)

[Publications] Murata, J., Takase, H, Hiratsuka, K.: "Characterization of a novel GT-box binding protein from Arabidopsis"Plant Biotechnology. 19. 103-112 (2002)

[Publications] 平塚和之: "次世代の農薬開発"ソフトサイエンス社. 171-180 (2003)

平塚和之横浜国立大学, 大学院・環境情報研究院, 教授 (30202279)