2003 Fiscal Year Annual Research Report
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14370103
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
足立 昭夫 徳島大学, 医学研究科, 教授 (90127043)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小山 一 徳島大学, 医学研究科, 助教授 (80109074)
藤田 美歌子 徳島大学, 医学研究科, 助手 (00322256)
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| Keywords | HIV-1 / HIV-2 / Vif / Vpx / Vpr / Vpu / Nef |
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| Research Abstract |
本研究では、HIVアクセサリー蛋白質の機能領域とこれに関与する細胞因子を系統的かつ網羅的な点変異体解析で確定し、アクセサリー蛋白質の機能の本態解明を目指している。本年度は主として、(1)HIV-1 Vifのプロテアソーム分解とその生物学的意義、(2)HIV-2 Vpxのマクロファージでの機能解析、(3)HIV-1 Vpuの変異体作製、(4)HIV-1 Vifと感染者の病態との関係、(5)HIV-1 Nefとウイルス感染性の関係、について分子遺伝学的解析を行ない、以下の成果を得た。
(1)Vif(HIV-1 NL432クローン)は細胞の種類によらずに急速にプロテアソーム分解されるが、この性質はHIV-1アクセサリー蛋白質中でユニークであった。二つのβ-ストランド構造がこのVifの安定性とウイルス感染性の維持に必須であると推定された。Vifには細胞内至適発現レベルがあることも明らかになり、プロテアソーム分解の生物学的意義が示された。(2)Vpx(HIV-2 GL-ANクローン)はマクロファージ中でのウイルスDNA合成に必須であることを示唆する結果を得た。一方、これと構造的に酷似しているHIV-1 Vprはマクロファージ中でウイルスゲノムの核移行に必須であることが知られている。(3)Vpu(HIV-1 NL432クローン)の全領域にわたる部位特異的変異体15種を作製した。Nef変異体30種とともにその基本性状を検討中である。(4)HIV-1感染者由来Vifをウイルス感染性測定用カセットクローンに挿入して検討したところ、Vif活性と病態との間で正の相関が認められた。(5)nef遺伝子のみを交換したキメラウイルスの増殖曲線より、Nef自体にウイルス感染性付与に関する顕著な活性の差があることが明らかになった。
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[Publications] Fujita, M.: "Amino acid residues 88 and 89 in the central hydorophilic region of human immunodeficiency virus type 1 Vif are critical for viral …"Journal of Virology. 77. 1626-1632 (2003)
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[Publications] Fujita, M.: "Susceptibility of HVS-immortalized lymphocytic HSC-F cells to various strains and mutants of HIV/SIV"International Journal of Molecular Medicine. 11. 641-644 (2003)
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[Publications] Ueno, F.: "Vpx and Vpr proteins of HIV-2 up-regulate the viral infectivity by a distinct mechanism in lymphocytic cells"Microbes and Infection. 5. 387-395 (2003)
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[Publications] Akari, H.: "High level expression of Human Immunodeficiency Virus type-1 Vif inhibits viral infectivity by modulating proteolytic processing …"Journal of Biological Chemistry. 279. 12355-12362 (2004)
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[Publications] Fujita, M.: "Expression of HIV-1 accessory protein Vif is controlled uniquely to be low and optimal by proteasome-degradation"Microbes and Infection. (in press).
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[Publications] Sakurai, A.: "Functional analysis of HIV-1 vif genes derived from Japanese long-term nonprogressors and progressors for AIDS"Microbes and Infection. (in press).
