バセドウ病を発症した抗TSH受容体抗体遺伝子導入マウスによる病因解明と応用研究

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14370326
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 赤水 尚史 京都大学, 医学研究科, 助教授 (20231813)
• Keywords: バセドウ病 / 甲状腺機能亢進症 / トランスジェニックマウス / TSHレセプター

Research Abstract

バセドウ病は抗TSHレセプター抗体(TRAb)によって惹起される臓器特異的自己免疫疾患であるがその作用機序や産生機構についてはほとんど解明されていない。一方我々はバセドウ病患者のリンパ球からTRAb産生B細胞クローンを単離・解析してきた。今回,TRAbの作用機序,産生機構を内分泌学的・免疫学的に解明するために,TRAb遺伝子導入トランスジェニックマウスを作製した。刺激型TRAb産生B細胞クローンであるB6B7クローンのリンパ球ゲノム遺伝子から,プロモーター及びイントロンエンハンサーの領域を含むHeavy chainとLight chainを単離し,IgM型DNAコンストラクトを作製した。同DNAをC57BL/6Jマウスにマイクロインジェクションし,トランスジェニックマウスを作製した。サザンブロット法によって遺伝子導入を確認した5系統において,分泌型・膜型のヒトIgMの発現を確認した。12-16週齢のTG(n=74)とNTG(n=38)の血清中のfT4とTSHの濃度を測定では、fT4;TG2.1±0.63ng/dl(mean±SD),NTG1.2±0.30ng/dl : TSH;TG1.3±1:2ng/ml, NTG4.4±2.2ng/mlと有意な差がみられた(P<0.0001)。TGで,fT4とヒトIgM(相関係数(r)=0.507)の相関が見られ(P<0001),N=51(69%)にhyperthyroidismが認められた。^<99m>technetium pertechnetate甲状腺摂取率では、120分値(peak値);TG(n=3)16.4±3.14%, NTG(n=3)7.8±0.644%と有意な差が見られ(P<0.001), Planer像でもuptakeの差が認められた。TGにおいて、末梢血、骨髄、脾臓のいづれにおいてもB細胞数の減少が認められ、自己寛容の成立が示唆された。

Research Products

• [Publications] Akamizu T, Ozaki S, Hiratani H, Uesugi H, Sobajima J, Hataya Y, Kanamoto N, Saijo M, Hattori Y, Moriyama K, Ohmori K, Nakao K.: "Drug-induced neutropenia associated with anti-neutrophil cytoplasmic antibodies (ANCA) : possible involvement of complement in granulocyte cytotoxicity"Clin Exp Immunol. 127(1). 92-98 (2002)
• [Publications] Moriyama K, Tagami T, Akamizu T, Usui T, Saijo M, Kanamoto N, Hataya Y, Shimatsu A, Kuzuya H, Nakao K.: "Ghrelin expression in islet cell tumors : augmented expression of ghrelin in a case of glucagonoma with multiple endocrine neoplasm type I"J Clin Endocrinol Metab. 87(11). 4885-4888 (2002)
• [Publications] Moriyama K, Tagami T, Akamizu T, Usui T, Sajio M, Kanamoto N, Hataya Y, Shimatsu A, Kuzuya H, Nakao K.: "Thyroid hormone action is disrupted by bisphenol A as an antagonist"J Clin Endocrinol Metab. 87(11). 5185-5190 (2002)
• [Publications] Ariyasu H, Takaya K, Hosoda H, Iwakura H, Ebihara K, Mori K, Ogawa Y, Hosoda K, Akamizu T, Kojima M, Kanagawa K, Nakao K.: "Delayed short-term secretory regulation of ghrelin in obese animals : evidenced by a specific RIA for the active form of ghrelin"Endocrinology. 143(9). 3341-3350 (2002)
• [Publications] Sellitti DF, Doi SQ, Akamizu T, Koshiyama H.: "No abstract available. Comment on "thyrotropin receptor expression in cardiac muscle tissue""J Clin Endocrinol Metab. 87(2). 946 (2002)
• [Publications] Akamizu T, Nakao K, Imanaka Y.: "Economic Evaluation of Female Hormone Replacement Therapy for Osteoporosis and Fractures in Elderly Women"医療経済研究機構. 11. 23-42 (2002)
• [Publications] Akamizu T.: "The Genetics of Complex Thyroid Diseases. The genetics of thyroid complex diseases. 123-136, 2002Association of AITD with microsatellite markers for TSHR and CTLA-4 in Japanese patients. In : Akamizu T, Kasuga M and Davies TF (Eds.)"Springer-Verlag, Tokyo. 230 (2002)