増殖可能な小肝細胞を用いたハイブリッド型人工肝蔵開発の研究

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14370344
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 松下 通明 北海道大学, 医療技術短期大学部, 教授 (20250425)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 蒲池 浩文 北海道大学, 医学部附属病院, 医員 ; 藤堂 省 北海道大学, 大学院・医学研究科, 教授 (60136463)
• Keywords: 小肝細胞 / in vitro増殖 / 肝特異機能

Research Abstract

パーコールを用いた独自のgradient分離法にて肝臓より小肝細胞を分離した。分離された小肝細胞を用いて以下の検討をおこなった。
1.増殖性
DNA量を経時的に測定した。nicotinamide添加baseとした培養では、培養経過と共に増殖し、2週間で前値の3倍となった。さらに培養液に1% DMSOを添加すると、DNA量は更に増加し、2週間で前値の4倍に有意に増加した。小肝細胞はin vitroの条件で増殖力が旺盛であることが判明した。
2.肝特異機能評価
・尿素合成能
平板培養では、3日目まで急激に低下し、7日目以降は低値で安定した。この傾向は培養液への添加剤の有無によらず一定の傾向であった。
・糖新生能
尿素合成能と同様の推移を示した。
小肝細胞は、成熟肝細胞に比し旺盛な増殖能を示した。しかし一方では、増殖能の上昇と共に肝特異機能は低下していた。これは、増殖期には機能発現が低下するものと考えられた。増殖する小肝細胞が自己修復能を有するか、生体内投与における増殖効果を引き続き検討して行く予定である。

Research Products

• [Publications] Kamachi H: "Rat small hepatocytes for liver support ; the growth and metabolic activities in culture"Journal of Artificial Organs. 5. 24-29 (2002)
• [Publications] Okubo H: "Noble method for firster formation of rat mixed liver spheroids"Artif Organs. 26(6). 497-505 (2002)