神経幹細胞を応用した脳腫瘍に対する新しい分子・細胞療法の開発

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14370446
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 矢崎 貴仁 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (80200484)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 篠田 淳男 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (60306719) ; 岡野 栄之 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (60160694) ; 河瀬 斌 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (40095592) ; 石原 順 日本たばこ産業(株), 主任研究員
• Keywords: 悪性脳腫瘍 / 神経幹細胞 / 単純ヘルペスウイルス / Musashi promoter / γ34.5

Research Abstract

悪性脳腫瘍に対しては手術・放射線・化学療法が行われているが、わずかな延命効果が得られるにすぎず、この疾患に対する遣伝子治療のうち、腫瘍内で特異的に増殖するウイルスベクターを腫瘍内に投与する腫瘍融解性のウイルス療法はもっとも効果の期待される治療法のひとつである。神経幹細胞をcell sortingにて分離しgliomaU87MGと共培養、またはconditioned mediumと置換したところ有意に細胞増殖が抑制された。また、ヌードマウス脳腫瘍モデルにおいて神経幹細胞と1:1に混合したU87MGは単独の場合に比べて有意に生存延長効果を認めた。一方複製型ヘルペスベクターを用いたウイルス療法の効果を高めるためにγ34.5遺伝子が欠失しているHSV-G207に、Musashi promoterで発現されるγ34.5遺伝子を組み込み腫瘍内増殖能が高くかつ腫瘍特異性の高い第三世代ヘルペスウイルスベクターを作成した。まず、Musashi promoterのグリオーマにおける活性を調べるためGFP発現プラスミドを作成して解析したところ複数の細胞株で他の腫瘍細胞株よりも有意に高い活性を示した。次にMusashi-promoter下流にγ34.5遺伝子を組み込んだプラスミドよりHSV amplicon vectorを構築の上HSV-G207をhelper virusとしてdefectiveHSVvectorを作成した。これをgliomaU87MGにin vitroで感染させるとG207単独よりも有意に細胞傷害効果を示した。