2002 Fiscal Year Annual Research Report

ポリアミンとRNA、蛋白質との相互作用に基づく細胞機能のモジュレーション

Research Project

Project/Area Number	14370739
Research Institution	Chiba University
Principal Investigator	五十嵐一衛千葉大学, 大学院・薬学研究院, 教授 (60089597)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	柏木敬子千葉大学, 大学院・薬学研究院, 助教授 (80169424)
Keywords	ポリアミン / スペルミン / スペルミジン / σ^<38> / RF2 / アンチザイム / NMDA受容体 / イフェンプロジル
Research Abstract	1.大腸菌においてポリアミンにより合成促進を受ける蛋白質として、オリゴペプチド輸送に関わるオリゴペプチド結合蛋白質、アデニル酸シクラーゼに次いで、RNAポリメラーゼσ^<38>因子を見出した。σ^<38>因子のポリアミンによる合成促進は、N末端から33番目の終止コドンUAGのread through促進によるものであった。このポリアミンによる促進は、UAG依存のsuppressor Gln-tRNA^<Gln>のリボソームへの結合がポリアミンにより促進を受けるためであった。 2.大腸菌では終結因子RF1のmRNAの26番目に終止コドンが存在し、+1 frameshiftによりRF2が合成される。このRF2合成に対するポリアミンの効果を検討したところ、ポリアミンは+1 frameshiftを促進しないことが明らかとなった。一方、マウスのアンチザイムmRNAの+1 frameshiftに対するポリアミンの効果を大腸菌で検討したところ、ポリアミンは真核細胞の場合と異なり強く+1 frameshiftを阻害することが明らかとなった。 3.ポリアミンはNMDA受容体活性を脱分極時に促進するが、その際のポリアミンの結合部位をsite-directed mutagenesisにより作製した変異NMDA受容体活性を測定することにより同定し、アゴニスト結合領域より更にN末端側にあるこの領域を調節領域(R-domain)と命名した。この約350アミノ酸残基から成るR-domain(His-tag付加)を大腸菌に発現させ、その性質を検討した。NR1Rはスペルミン及びイフェンプロジルと強く結合したが、NR2AR及びNR2BRはスペルミンとは強く結合したがイフェンプロジルとは全く結合しなかった。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Nishimura, K. et al.: "Essential role of S-adenosylmethionine decarboxylase in mouse embryonic development"Genes Cells. 7. 41-47 (2002)
[Publications] Kashiwagi, K. et al.: "Channel blockers acting N-methyl-D-aspartate receptors : Differential effects of mutations in the vestibule and ion channel pore"Mol. Pharmacol.. 61. 533-545 (2002)
[Publications] Nishimura, K. et al.: "Inhibition of cell growth through inactivation of eIF5A by deoxyspergualin"Biochem. J.. 363. 761-768 (2002)
[Publications] Kashiwagi, K. et al.: "The ATPase activity and the functional domain of PotA, a component of the spermidine-preferential uptake system in Escherichia coli"J. Biol. Chem.. 277. 24212-24219 (2002)
[Publications] Yoshida, M. et al.: "Polyamines enhance synthesis of the RNA polymerase σ^<38> by suppression of an amber termination codon in the open reading frame"J. Biol. Chem.. 277. 37139-37146 (2002)
[Publications] Raj, V.S.et al.: "Decrease in cell viability in an RMF, σ^<38> and OmpC triple mutant of Escherichia coli"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 299. 252-257 (2002)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

ポリアミンとRNA、蛋白質との相互作用に基づく細胞機能のモジュレーション

Principal Investigator

五十嵐 一衛 千葉大学, 大学院・薬学研究院, 教授 (60089597)

Research Products

[Publications] Nishimura, K. et al.: "Essential role of S-adenosylmethionine decarboxylase in mouse embryonic development"Genes Cells. 7. 41-47 (2002)

[Publications] Kashiwagi, K. et al.: "Channel blockers acting N-methyl-D-aspartate receptors : Differential effects of mutations in the vestibule and ion channel pore"Mol. Pharmacol.. 61. 533-545 (2002)

[Publications] Nishimura, K. et al.: "Inhibition of cell growth through inactivation of eIF5A by deoxyspergualin"Biochem. J.. 363. 761-768 (2002)

[Publications] Kashiwagi, K. et al.: "The ATPase activity and the functional domain of PotA, a component of the spermidine-preferential uptake system in Escherichia coli"J. Biol. Chem.. 277. 24212-24219 (2002)

[Publications] Yoshida, M. et al.: "Polyamines enhance synthesis of the RNA polymerase σ^<38> by suppression of an amber termination codon in the open reading frame"J. Biol. Chem.. 277. 37139-37146 (2002)

[Publications] Raj, V.S.et al.: "Decrease in cell viability in an RMF, σ^<38> and OmpC triple mutant of Escherichia coli"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 299. 252-257 (2002)

五十嵐一衛千葉大学, 大学院・薬学研究院, 教授 (60089597)