2004 Fiscal Year Annual Research Report
出芽酵母のDNA複製阻害タンパク質の生理活性の同定
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14380332
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| Research Institution | National Institute for Basic Biology |
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Principal Investigator |
小林 武彦 基礎生物学研究所, ゲノム動態研究部門, 助手 (40270475)
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| Keywords | リボソームRNA遺伝子 / 遺伝子増幅 / DNA複製阻害 / Fob1 / 出芽酵母 / MCMヘリカーゼ / ゲノムの安定性 / RFB |
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| Research Abstract |
リボソームRNAをコードする遺伝子(rDNA)は細菌からヒトの細胞に至まで多コピーで存在し、真核細胞では反復遺伝子として存在する。通常反復遺伝子ではリピート間での相同組み換えにより、コピー数が徐々に減少していくが、rDNAの場合、コピー数安定化機構が存在し、それにより例えば出芽酵母では約150コピー前後で安定に保持されている。コピー数安定化機構の一つは、組み換えにより減少したコピー数を元に戻す遺伝子増幅作用である。出芽酵母では申請者らが単離したDNA複製阻害タンパク質(Fob1p)が、このrDNA増幅作用に必須な役割を果たしている。本研究の最終的な目標はFob1pによる遺伝子増幅作用の分子メカニズムを解明することである。
昨年までに、Fob1pは複製阻害配列(RFB)にin vivo、in vitroで共に特異的な結合活性を示すこと、特にin vitroではRFBに1周巻付く特殊な結合様式を示すことを発見した。本年度は実施計画に基づき、Fob1p自身に複製阻害活性があるか否かを調べるため、ヒト培養細胞から単離したMCMヘリカーゼに対するRFB-Fob1p複合体の阻害活性を調べた。その結果、in vivoで見られたような強い阻害活性はまだ再現されていないが、ある程度の阻害活性の存在は認められた。その弱い活性の原因として1)Fob1p以外の因子が複製阻害に関わっている、2)in vitroでの反応条件が適当ではない、の2つの可能性が考えられる。現在Fob1pと相互作用するタンパク質を解析すると共に、反応条件の検討を行っている。
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Research Products
(4 results)
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[Journal Article] SIR2 regulates recombination between different rDNA repeats, but not recombination within individual rRNA genes in yeast.2004
Author(s)
Kobayashi, T., Horiuchi, T., Tongaonkar, P., Vu, L., Nomura, M.
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Journal Title
Description
「研究成果報告書概要(欧文)」より
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