2003 Fiscal Year Annual Research Report
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14550818
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
金原 数 東京大学, 大学院・工学系研究科, 講師 (30282578)
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| Keywords | シャペロニン / ナノクラスター / ATP |
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| Research Abstract |
半導体として知られている硫化カドミウムナノクラスターとシャペロニンを用いて、ナノデバイスの構築を試みた結果、DMF溶液中で調製した硫化カドミウムナノクラスターを大腸菌由来のシャペロニンであるGroELのトリスバッファ溶液に加えるという極めて単純な手法により、バッファ水溶液中では不安定な硫化カドミウムナノクラスターをGroELが安定化できることを見いだした。さらに、高度好熱菌由来のT.th cpnも同様に硫化カドミウムナノクラスターを安定化した。サイズ排除クロマトグラフィー、光散乱測定および透過型電子顕微鏡による観察結果から、これらのシャペロニンが会合することなく、中央の空孔に取り込むことで硫化カドミウムナノクラスターを安定化していることが分かった。得られた複合体は熱的に安定であり、GroELでは60度近くまで、T.th cpnでは90度近くまで硫化カドミウムナノクラスター由来の蛍光を発し続けた。また、メチルビオロゲンを加えて蛍光の消光滴定を行なったところ、シャペロニンが存在しない場合と比べ、15〜20倍近くも消光されにくいことが分かった。
続いて、この複合体にMg-ATPを加えたところ、即座に沈殿が生じ、内包されていたナノクラスターが放出されることが分かった。この際、Mg^<2+>のみ、ATPのみでは全く変化を起こさず、Mg-ATPに対し、特異的に応答することが分かった。これは、細胞中で、変性タンパクのリフォールディングにはMg-ATPが必須であることと対応しており、Mg-ATPによる硫化カドミウムナノクラスターの放出が細胞内と同様の機構で進んでいることを示唆している。また、GroEL、T.th cpnいずれも硫化カドミウムナノクラスターを取り込んだことから、幅広いシャペロニンが同様の機能を有することが期待される。
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Research Products
(1 results)
