ヒト胃粘膜腸上皮化生細胞における細胞分化異常と遺伝子不安定性に関する研究

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14570174
• Research Institution: Aichi Cancer Center Research Institute
• Principal Investigator: 稲田 健一 愛知県がんセンター, 腫瘍病理学部, 主任研究員 (70246081)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 中西 速夫 愛知県がんセンター, 腫瘍病理学部, 室長 (20207830)
• Keywords: 腸上皮化生 / 腺管分離法 / 細胞分化マーカー / 胃腸混合型 / 腸単独型 / 遺伝子不安定型 / マイクロサテライトマーカー / hMLH1

Research Abstract

本年度は以下の成果を得た.
1.サンプルの採取と化生の分類:胃癌により外科的切除された70例の新鮮胃非腫瘍部幽門部粘膜より,腺管分離法を用いて幽門部腺管を単離後,化生(-),胃腸混合型化生,腸単独型化生に選別した.各タイプにつき約20症例ごとに-20℃でストックした.同時に隣接部胃粘膜の組織切片を作製し,化生の有無とタイプのチェックを行った.
2.分離腺管からのDNA採取とマイクロサテライトマーカーを用いたreplication error (RER)解析:分離した新鮮な胃粘膜腺管は少量であるため,抽出されるDNAもごく少量であり,複数のマイクロサテライトマーカーを対象とするPCRが手技的に困難な場合がしばしばあった.現在もサンプルの採取と化生のタイプによる選別を継続している.
3.腫瘍組織からのDNA採取とマイクロサテライトマーカーを用いたRER解析:進行癌20症例では腫瘍組織の採取を同時に行い,病理組織切片を作成後,胃型,腸型の細胞分化マーカーを用いた染色により腫瘍の形質発現(胃型,胃腸混合型,腸型)を検討するとともに,免疫組織化学的にミスマッチ修復遺伝子hMLH1の発現を検討した.同時に新鮮腫瘍組織からDNAを抽出,RER解析を施行しmicrosatellite instability (MSI)と腫瘍の細胞分化との関係を調べた.
4.胃癌の形質発現とMSI, hMLH1発現との関係:MSIを検索した20例中MSI-high症例は5例であり,すべてhMLH1発現が陰性,形質発現では胃型2例,胃腸混合型0例,腸型2例,分類不能型1例であった.今回検索した20例においては,明らかな関連性は見出されなかった.
5.来年度は,新たに分離した化生腺管を用いて化生のタイプとMSIとの関連性を検討する.さらに隣接部分の組織切片中の化生腺管を対象に,マイクロダイセクション法を施行し同様の検索を進める.

Research Products

• [Publications] Yamamoto, M., Inada, K., et al.: "Independent variation in suseeptibilities of six different mouse strains to induction of pepsiongen-altered pylorie glands and gastric tumor intestinalization by N-methyl-N-nitrosourea"Cancer Lett.. 179. 121-132 (2002)
• [Publications] Nozaki, K., Inada, K., et al.: "Reversibility of heterotopic proliferative glands in glandular stomach of Helicobacter pylori -infected Mongolian Gerbils on eradication"Jpn. J. Cancer Res.. 93. 374-381 (2002)
• [Publications] Yuasa, H., Inada, K., et al.: "A phenotypic Shift from gastric-intestinal to solely intestinal cell types in intestinal metaplasia in rat stomach following with X-rays"J. Toxicol. Pathol.. 15. 85-93 (2002)
• [Publications] Koike, M., Inada, K., et al.: "Cellular differentiation status of epithelial polyps of the colorectum -The gastric foveolar cell-type in hyperplastic polyps"Histopathology. (in press). (2003)
• [Publications] 野崎浩二, 稲田健一, 他: "Helicobacter pylori感染と胃癌発生"日本消化器病学会雑誌. 99(3). 247-252 (2002)