気管支喘息治療の新しい分子標的としての細胞質フォスホリパーゼA2の検討

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14570412
• Research Institution: Tottori University
• Principal Investigator: 佐野 博幸 鳥取大学, 医学部附属病院, 助手 (80325018)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 佐野 安希子 鳥取大学, 医学部, 助手 (80335512) ; 山崎 章 鳥取大学, 医学部附属病院, 助手 (70325009)
• Keywords: 好酸級 / フォスホリパーゼA2

Research Abstract

ロイコトリエンやトロンボキサン受容体拮抗剤が気管支喘息の治療薬として有効性が認められていることから,これら双方の合成を調節細胞質フォスフォリパーゼA2(cPLA2)はさらに効率の良い気管支喘息の分子標的治療薬になると考えられる.我々はこれまでにcPLA_2がヒト好酸球のβ1-,β2-インテグリン依存性の接着を調節すること,さらに、抗原感作ラットを用いた実験でcPLA_2阻害剤が好酸球の肺への浸潤と気道過敏性の亢進を抑制すること等を報告してきたが,今回のテーマは,気管支喘息患者からの末梢血や気管支肺胞洗浄液中の炎症性細胞,特に好酸球におけるcPLA_2の発現量や活性化が亢進しているのかどうかについて検討している.
1.まず初めに好酸球のアラキドン酸産生能について検討では,健常者および気管支喘息患者それぞれ16名の末梢血好酸球を1μMのfMLPで刺激したところ,アラキドン酸の分泌能は気管支喘息群で有意に亢進していた.2.次に両群の末梢血好酸球2X10^6cellsの蛋白を抽出し,1μMのfMLP刺激によるcPLA2活性化の違いを検討したところ、気管支喘息群で基礎値,fMLP刺激後ともに健常群に比べて活性化の亢進を認めた(各n=12).
これらの気管支喘息群末梢血好酸球のアラキドン酸産生能、cPLA2活性化の亢進が,cPLA2発現量の違いによるものか,または生体内において既にprimingされているための相違であるかを確かめるために,3.現在,好酸球中のcPLA2の発現量の定量をsandwich ELISA法にて測定した.発現量は0.1ng/10^6cells単位と微量であるが,気管支喘息群で発現量の亢進が有意である(各n=8).平成16年度は症例を迫加し,また、real time PCR法で確認する予定である.学会報告,また論文投稿は平成16年度に行う予定である.