2003 Fiscal Year Annual Research Report

In vitro骨破壊モデルにおける滑膜細胞増殖と破骨細胞への分化メカニズムの解明

Research Project

Project/Area Number	14570433
Research Institution	Tokai University
Principal Investigator	鈴木康夫東海大学, 医学部, 助教授 (90129495)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	谷原正夫奈良先端技術大学院大学, 物質創成科学研究科, 教授 (50294286) 山田千穂東海大学, 医学部, 助手 (40317813)
Keywords	関節リウマチ / 骨破壊 / in vitro model / 破骨細胞 / RANKL / RANK / VEGF / 滑膜細胞 / TNFα
Research Abstract	関節リウマチ(RA)の骨破壊に硬骨細胞が深く関与していることが明らかになっている。本研究では,すでに確立したRA滑膜組織を用いたin vitro骨破壊モデルを用いて,滑膜マクロファージが増殖し硬骨細胞に分化する過程に関わる分子を同定し治療法を開発することを目的に検討を行った。初年度において,RA滑膜組織ではIL1,TNFα,IL-6といった炎症性サイトカインの産生が多く,またマクロファージの分化因子であるMCSFや血管新生誘導因子であるVEGFの産生も有意に多いことが明らかになった。また,RANKL/RANK系シグナルをosteoprotegerinで抑制すると破骨細胞,骨吸収窩形成が減少したことからRANKLとRANKの結合を阻害するペプチドを作製した。RANKのRANKL結合部位に相当するアミノ酸配列を持つ部分ペプチドを合成し破骨細胞形成に及ぼす効果を検討した。マウス骨髄細胞を活性型ビタミンD存在下で培養し破骨細胞を誘導する実験系ではRANK部分ペプチドの抑制件用がみられた。RA滑膜細胞を用いたin vitro骨破壊モデルにおいてもRANK部分ペプチドは破骨細胞の誘導を抑制した。さらに,マクロファージ分化を制御し破骨細胞のcommitment factorであるMCSFや血管新生誘導因子であるVEGFも多量に産生されていることから,その阻害を試みた。 MCSFを阻害するMCSFR-Fc融合蛋白は骨吸収を減少させなかったが,VEGFR-Fc融合蛋白は用量依存的に破骨細胞および骨吸収窩の形成を減少させた。VEGFレセプターの発現を免疫組織化学的に検討したところ,CD68陽性のマクロファージ系単核細胞および破骨細胞様多核細胞に発現がみられた。RA滑膜炎組織の病理学的な特徴の一つは新生血管の増生であり,また血管新生と骨破壊の程度が相関するとの報告もみられることからVEGF抑制が骨破壊を抑制したことは興味深い成績である。VEGFが直接的に破骨細胞の前駆細胞に件用しているのかRANKL/RANK系を介する間接作用かは今後検討する予定である。以上の成績より,滑膜組織からの破骨細胞形成にはRANKL-dependent pathwayとTNF等を介するRANKL-independent pathway,血管新生促進因子が複雑に関与している可能性が示された。今後,RANK部分ペプチドを用いた破骨細胞誘導抑制やVEGFを阻害する生理的インヒビター,モノクローナル抗体がin vivoにおいて実験的関節炎の骨破壊を抑制できるかを検討し,RA治療薬としての可能性を追求する予定である。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] 若林孝幸, ジャクソン加奈子, 山田千穂, 鈴木康夫: "骨軟骨破壊に対するMTX療法の現状と今後"Clinical Calcium. 13・6. 764-770 (2003)
[Publications] 鈴木康夫: "ステロイド誘発骨粗鬆症-疫学・病態・予防治療ガイドライン-"Osteoporosis Japan. 11・3. 427-436 (2003)
[Publications] Ichikawa Y, Kamatani N, Goto M, Kondo H, Saito T, Yasuo Suzuki, et al.: "Phase II dose ranging study of leflunomide in Japan"J New Remedies & Clinics. 52・7. 891-931 (2003)
[Publications] Chinen N, Tanihara M, Nakagawa M, Shinozaki K, Yamamoto E, Mizushima Y, Yasuo Suzuki: "Action of microparticles of heparin and alginate crosslinked gel when used as injectable artificial matrices to stabilize basic fibroblast growth factor and induce angiogensis by controlling its release."J Biomed Material Res. 67A. 61-68 (2003)
[Publications] 鈴木康夫: "ガイドラインに基づく関節リウマチの新薬物療法戦略レフルノミド"臨床と薬物治療. 22・12. 1102-1106 (2003)
[Publications] 鈴木康夫: "関節リウマチのMTX療法-我が国の現状とグローバルスタンダード-"Pharma Mdeica. 21・12. 43-47 (2003)
[Publications] 鈴木康夫: "第2回リウマチ性疾患研究会講演記録集リウマチの骨破壊と破骨細胞"インターサイエンス(東京). 4-9 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

In vitro骨破壊モデルにおける滑膜細胞増殖と破骨細胞への分化メカニズムの解明

Principal Investigator

鈴木 康夫 東海大学, 医学部, 助教授 (90129495)

Research Products

[Publications] 若林孝幸, ジャクソン加奈子, 山田千穂, 鈴木康夫: "骨軟骨破壊に対するMTX療法の現状と今後"Clinical Calcium. 13・6. 764-770 (2003)

[Publications] 鈴木康夫: "ステロイド誘発骨粗鬆症-疫学・病態・予防治療ガイドライン-"Osteoporosis Japan. 11・3. 427-436 (2003)

[Publications] Ichikawa Y, Kamatani N, Goto M, Kondo H, Saito T, Yasuo Suzuki, et al.: "Phase II dose ranging study of leflunomide in Japan"J New Remedies & Clinics. 52・7. 891-931 (2003)

[Publications] 鈴木康夫: "ガイドラインに基づく関節リウマチの新薬物療法戦略レフルノミド"臨床と薬物治療. 22・12. 1102-1106 (2003)

[Publications] 鈴木康夫: "関節リウマチのMTX療法-我が国の現状とグローバルスタンダード-"Pharma Mdeica. 21・12. 43-47 (2003)

[Publications] 鈴木康夫: "第2回リウマチ性疾患研究会 講演記録集 リウマチの骨破壊と破骨細胞"インターサイエンス(東京). 4-9 (2003)

鈴木康夫東海大学, 医学部, 助教授 (90129495)

[Publications] 鈴木康夫: "第2回リウマチ性疾患研究会講演記録集リウマチの骨破壊と破骨細胞"インターサイエンス(東京). 4-9 (2003)