細胞内signal伝達機講をターゲットとした静脈バイパス術後狭窄に対する治療戦略

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14571129
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 中澤 達 東京大学, 医学部附属病院, 助手 (60345204)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 新本 春夫 東京大学, 医学部附属病院, 助手 (30281702) ; 宮田 哲郎 東京大学, 医学部附属病院, 助教授 (70190791) ; 重松 宏 東京大学, 医学部附属病院, 助教授 (40134556) ; 重松 邦広 東京大学, 医学部附属病院, 助手 (20215966) ; 小山 博之 東京大学, 医学部附属病院, 助教授 (10241994)
• Keywords: 内膜肥厚 / 血管内皮細胞 / 血管平滑筋細胞 / 細胞内signal伝達機構

Research Abstract

本研究は、マウスを用いて自家静脈グラフトモデルを作成し、自家静脈グラフトにおける肥厚内膜内における血管内皮細胞と血管平滑筋細胞内においてそれぞれいかなるsignal pathwayが刺激されて内膜内で増殖しているかを検討することである。しかし、C57BI/J6系マウスの頚動脈の自家静脈置換は10倍の顕微鏡下で行ったにもかかわらず、作成した自家静脈置換マウスは、当初予定していた術後1日、2日、4日、7日、14日、28日、56日において安定した開存が得られず標本の採取が困難であった。徐々に手術成績は上がったが、当初の実験を遂行するほどの結果が得られず、実験プロトコールの見直しが必要となった。そのため、頚動脈結紮モデルによる検討に変更した。
IP3-R type1 hetero knock out mouse、IP-3 type2 homo knock out mouse、IP-3 type3 homo knock out mouseおよびcontrol mouseを対象に、頚動脈結紮28日後に総頚動脈を全長にわたって採取し、両端1mmを除いた中央部について500μm毎の横断面切片を作成しHE染色を行った。顕微鏡画像をコンピューターに取り込み、面積計算をしたのち、neointima area / medial area (NA/MA)を計算した。各検体につきNA/MAの最大値を用いた比較および全切片を用いた比較を行った。最大値での検討ではIP-3R type1 KO群、IP-3R type2 KO群はcontrol群に対し,NA/MAが有意に小さかった。全切片での検討では,IP-3R type2 KO群、IP-3R type3 KO群はcontrol群に対し、NA/MAが有意に小さかった。