2002 Fiscal Year Annual Research Report

生殖障害に関与する性分化遺伝子の解析と初期胚発生過程における分子細胞生物学的解明

Research Project

Project/Area Number	14571583
Research Institution	Keio University
Principal Investigator	末岡浩慶應義塾大学, 医学部, 助教授 (90162833)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	佐藤健二慶應義塾大学, 医学部, 助手 (50306825) 久慈直昭慶應義塾大学, 医学部, 講師 (80169987) 吉村泰典慶應義塾大学, 医学部, 教授 (10129736) 田島博人慶應義塾大学, 医学部, 助手 (30317193) 中林章慶應義塾大学, 医学部, 助手 (80306828)
Keywords	c-kit mutant / spermatogonia / WBB6F1(wild type)+ / + / hetero W^v / + / W / W^v / RT-PCR法 / Doxorubicin / Apoptosis
Research Abstract	1)配偶子形成障害モデルc-kit mutantマウスにおける生殖能障害の解明: 遺伝子変異によって胚発生後の胎生期における成長過程から精巣機能が影響を及ぼされる動物の生殖機能を分析した。Spermatogoniaの分化に関与する受容体型チロシンキナーゼレセプターc-kitのmutantマウスを用いて11週齢マウスWBB6F1(wild type)+/+,78個のアミノ酸の欠落があるhetero W/+,アミノ酸の点突然変異をもつhetero W^v/+,機能喪失性,突然変異遺伝子を2個持つW/W^vを使用した。各マウスより精巣細胞を分離し,抗マウスc-kit抗体(CD117)と反応させ,flow cytometryでc-kit陽性細胞率を解析した。また,精巣組織の組織学的検討,c-kit遺伝子発現についても検討した。この結果,W/W^vにおいて精巣重量の減少,精巣組織におけるspermatogenesisの著しい障害,免疫組織化学におけるc-kit発現の抑制RT-PCRによるc-kit mRNA発現の障害が確認された。 2)外因性配偶子形成障害モデルマウス作製とその障害機構の解明: 外因性の影響因子による配偶子形成障害モデルマウスを作製するために8週齢より12週間の少量doxorubicinの連続投与を行い,生殖能障害のメカニズムとその障害抑制の可能性について検討した。精巣重量はdoxorubicin投与により減少し,組織学的にはspermatogonia以降における減数分裂障害が認められた。免疫組織化学におけるc-kit発現の減少およびRT-PCR法によるc-kit mRNA発現の減少が証明され,c-kit遺伝子発現の抑制による分化障害機構が示唆された。Apoptosisの検討では,meiosisの早期過程におけるapoptosisの増加が認められ,同時にtelomerase活性を検出すると活性の増強が検出された。従って,toxic agentによる配偶子形成障害は,telomerase活性が増強し,障害機構に対抗して反応するが,結果としてapoptosisが生じ,c-kit mRNA発現の障害を介してmeitosisの抑制を生じることが示唆された。

Research Products

(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] 末岡浩: "着床前遺伝子診断の技術開発と可能性"産婦人科の世界. 55(春季増刊)(in press). (2003)
[Publications] 末岡浩: "着床前遺伝子診断の展望"産婦人科の世界. 54(11). 71-78 (2002)
[Publications] 末岡浩: "着床前診断"日本産婦人科学会雑誌. 54(9). N-374-N-379 (2002)
[Publications] 末岡浩: "精巣精子回収と成績:産婦人科医の立場から"泌尿器外科. 15(6). 649-652 (2002)
[Publications] 佐藤健二: "AZF遺伝子群に対するmultiplex PCR2法の有用性と診断効率の検証〜スクリーニングに適したmultiplex PCR法の考案〜"日本受精着床学会雑誌. 19(1). 161-164 (2002)
[Publications] 末岡浩: "胚生検技術の進歩と生殖医療への応用"産婦人科治療. 84(1). 73-79 (2002)
[Publications] 末岡浩(分担): "新しい産科学-生殖医療から周産期医療まで"(財)名古屋大学出版会. 283 (2002)
[Publications] 末岡浩(分担): "図説ARTマニュアル"永井書店. 509 (2002)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

生殖障害に関与する性分化遺伝子の解析と初期胚発生過程における分子細胞生物学的解明

Principal Investigator

末岡 浩 慶應義塾大学, 医学部, 助教授 (90162833)

Research Products

[Publications] 末岡 浩: "着床前遺伝子診断の技術開発と可能性"産婦人科の世界. 55(春季増刊)(in press). (2003)

[Publications] 末岡 浩: "着床前遺伝子診断の展望"産婦人科の世界. 54(11). 71-78 (2002)

[Publications] 末岡 浩: "着床前診断"日本産婦人科学会雑誌. 54(9). N-374-N-379 (2002)

[Publications] 末岡 浩: "精巣精子回収と成績:産婦人科医の立場から"泌尿器外科. 15(6). 649-652 (2002)

[Publications] 佐藤健二: "AZF遺伝子群に対するmultiplex PCR2法の有用性と診断効率の検証〜スクリーニングに適したmultiplex PCR法の考案〜"日本受精着床学会雑誌. 19(1). 161-164 (2002)

[Publications] 末岡 浩: "胚生検技術の進歩と生殖医療への応用"産婦人科治療. 84(1). 73-79 (2002)

[Publications] 末岡 浩(分担): "新しい産科学-生殖医療から周産期医療まで"(財)名古屋大学出版会. 283 (2002)

[Publications] 末岡 浩(分担): "図説ARTマニュアル"永井書店. 509 (2002)

末岡浩慶應義塾大学, 医学部, 助教授 (90162833)

[Publications] 末岡浩: "着床前遺伝子診断の技術開発と可能性"産婦人科の世界. 55(春季増刊)(in press). (2003)

[Publications] 末岡浩: "着床前遺伝子診断の展望"産婦人科の世界. 54(11). 71-78 (2002)

[Publications] 末岡浩: "着床前診断"日本産婦人科学会雑誌. 54(9). N-374-N-379 (2002)

[Publications] 末岡浩: "精巣精子回収と成績:産婦人科医の立場から"泌尿器外科. 15(6). 649-652 (2002)

[Publications] 末岡浩: "胚生検技術の進歩と生殖医療への応用"産婦人科治療. 84(1). 73-79 (2002)

[Publications] 末岡浩(分担): "新しい産科学-生殖医療から周産期医療まで"(財)名古屋大学出版会. 283 (2002)

[Publications] 末岡浩(分担): "図説ARTマニュアル"永井書店. 509 (2002)