酸化ストレスによる歯髄培養細胞内SODの動態と免疫応答

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14571824
• Research Institution: Nihon University
• Principal Investigator: 武内 ひとみ 日本大学, 松戸歯学部, 助手 (10130585)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 木村 功 日本大学, 松戸歯学部, 講師 (60307874) ; 河野 雅弘 東北大学, 東北大学未来科学技術共同研究センター・量子生命反応工学創製寄付研究部門, 教授 (70333226)
• Keywords: 酸化ストレス / ラジカルEIA / SOD / 歯髄培養細胞

Research Abstract

SODは近年細胞内情報伝達シグナルとしてその生理作用が生体恒常性を担う一つの重要な因子として認識されている。そこで、歯髄炎のメカニズムを解明する目的で歯髄培養線維芽細胞に酸化ストレスを作用させ、細胞内SODの動態を検討した結果、HX-HOD系から発生するO_2^-を細胞に作用させ、細胞内SODとNOSの動態を検討した。O_2^-を歯髄線維芽細胞に作用させると細胞内SODは上昇し、ESRスピンとラッピング法において検索したSOD様活性は、2.09unit/lであった。次に、NOS蛋白量を検討した結果、O_2^-を作用させた後に増加を認めた。また、炎症性サイトカインであるIL-1βおよぴIL-6の生成量も増加した。次に、歯髄培養線維芽細胞内のSOD量をあらかじめ高くしLPSを作用させた結果、IL-1βおよぴIL-6の生成量は減少した。SODの産生に伴う炎症性サイトカイン産生を明確にするために時間依存における酸化ストレスを作用させた際のSOD,各炎症性サイトカインの遺伝子発現を検討した結果、SODの発現が時間依存的認められ各炎症性サイトカインの発現が抑制されたことから、細胞内SODの発現に伴う炎症性サイトカインの抑制が示唆された。また細胞内NOS発現に伴う炎症性サイトカインの動態を検討した結果、SODと同様に炎症性サイトカインの発現は減少したが、IL-10の発現が認められた。以上のことから、酸化ストレスに対する防御反応として、NOSの発現に伴い、IL-10の発現により炎症反応が抑制されている可能性が示唆された。細胞内における2つの防御機構としてSODとNOSの炎症反応における動態を検討したわけだが、今後細胞内におけるSODとNOSとの相互作用についても検討を行い、歯髄における炎症反応メカニズムを解明したいと考える。