2003 Fiscal Year Annual Research Report

細胞周期による中心体キナーゼAurora-Aの活性化の時間的・空間的イメージング

Research Project

Project/Area Number	14657039
Research Institution	Nagoya University
Principal Investigator	浦野健名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (70293701)
Keywords	Aurora / 細胞周期 / タイムラプス観察 / プロテインキナーゼ / ヒストンH3リン酸化 / ヒストンH3メチル化 / 修飾特異的モノクローナル抗体 / GFP融合タンパク質
Research Abstract	ショウジョウバエや酵母において染色体分離の調節蛋白質として同定されたプロテインキナーゼのヒトホモローグであるAurora-A, Aurora-BおよびAurora-Cは様々ながん組織においてDNA増幅や蛋白質の発現増強が高率に認められている。またAurora-Aにおいては造腫瘍能を有することも報告されている。本研究では,染色体の赤道面への整列を時間的・空間的・物理的に制御しているプロテインキナーゼAuroraの(細胞周期における)時間的および空間的な活性化および不活性化をin vivoで可視化する系を確立し,この系を用いてAuroraの空間的・時間的な制御機構を解明した検討した。・昨年報告したAurora-Aに引き続き,Aurora-BまたはAurora-CをGFP融合タンパク質として発現する細胞株を樹立しタイムラプス観察を行い,時間的空間的配置を決定した。Aurora-CもAurora-Bと同様に染色体パッセンジャータンパク質であることが判明した。・Auroraファミリーの活性化に必須であるリン酸化部位を同定し,リン酸化モノクローナル抗体を作製することにより,時間的空間的な活性化を可視化した(研究業績#1)。・Aurora-Bにより細胞分裂期特異的にヒストンH3の10番目セリンがリン酸化され,さらに9番目リジンのメチル化との間にクロストークが存在することを,修飾特異的モノクローナル抗体を作製することにより証明した(研究業績#2-4)。・開発したアンチセンス、DNA法を用い,Aurora-Aもヒト細胞において染色体分配に関与することを確認した。本研究ではAuroraファミリーの活性化を可視化する方法を確立した。その結果,Auroraファミリーは細胞分裂期中ごく短期間にそれぞれの局所において活性化されることが判明した。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Yasui Y.et al.: "Autophosphorylation of a newly identified site of Aurora-B is indispensable for cytokinesis."J.Biol.Chem.. (in press). (2004)
[Publications] Soejima H.et al.: "Silencing of imprinted CDKNIC gene expression is associated with loss of CpG and histone H3 lysine 9 methylation at DMR-LIT1 in esophageal cancer."Oncogene. (in press). (2004)
[Publications] Nakagawachi T.et al.: "Silencing effect of CpG island hypermethylation and histone modifications on O6-methylguanine-DNA methyltransferase (MGMT) gene expression in human cancer."Oncogene. 22. 8835-8844 (2003)
[Publications] Higashimoto K.et al.: "Loss of CpG Methylation Is Strongly Correlated with Loss of Histone H3 Lysine 9 Methylation at DMR-LIT1 in Patients with Beckwith-Wiedemann Syndrome."Am.J.Hum.Genet.. 73. 948-956 (2003)
[Publications] Sasagawa Y.et al.: "Caenorhabditis elegans RBX1 is essential for meiosis, mitotic chromosomal condensation and segregation, and cytokinesis."Genes Cells. 8. 857-872 (2003)
[Publications] Mitsuhashi S.et al.: "Usage of tautomycetin, a novel PP1 specific inhibitor, reveals that PP1 is a positive regulator of Raf-1 in vivo."J.Biol.Chem.. 278. 82-88 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

細胞周期による中心体キナーゼAurora-Aの活性化の時間的・空間的イメージング

Principal Investigator

浦野 健 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (70293701)

Research Products

[Publications] Yasui Y.et al.: "Autophosphorylation of a newly identified site of Aurora-B is indispensable for cytokinesis."J.Biol.Chem.. (in press). (2004)

[Publications] Soejima H.et al.: "Silencing of imprinted CDKNIC gene expression is associated with loss of CpG and histone H3 lysine 9 methylation at DMR-LIT1 in esophageal cancer."Oncogene. (in press). (2004)

[Publications] Nakagawachi T.et al.: "Silencing effect of CpG island hypermethylation and histone modifications on O6-methylguanine-DNA methyltransferase (MGMT) gene expression in human cancer."Oncogene. 22. 8835-8844 (2003)

[Publications] Higashimoto K.et al.: "Loss of CpG Methylation Is Strongly Correlated with Loss of Histone H3 Lysine 9 Methylation at DMR-LIT1 in Patients with Beckwith-Wiedemann Syndrome."Am.J.Hum.Genet.. 73. 948-956 (2003)

[Publications] Sasagawa Y.et al.: "Caenorhabditis elegans RBX1 is essential for meiosis, mitotic chromosomal condensation and segregation, and cytokinesis."Genes Cells. 8. 857-872 (2003)

[Publications] Mitsuhashi S.et al.: "Usage of tautomycetin, a novel PP1 specific inhibitor, reveals that PP1 is a positive regulator of Raf-1 in vivo."J.Biol.Chem.. 278. 82-88 (2003)

浦野健名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (70293701)