2003 Fiscal Year Annual Research Report
発生工学的手法を用いた白血病関連転写因子TELの機能解析
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14657248
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| Research Institution | Dokkyo Medical University |
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Principal Investigator |
三谷 絹子 獨協医科大学, 医学部, 教授 (50251244)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
牧 和宏 獨協医科大学, 医学部, 助手 (50337391)
佐々木 光 獨協医科大学, 医学部, 助手 (60282638)
和賀 一雄 獨協医科大学, 医学部, 講師 (00285917)
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| Keywords | TEL / トランスジェニックマウス / ノックアウトマウス / コンディショナルマウス / ES / Creリコンビナーゼ / Lox-P配列 |
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| Research Abstract |
1.TELトランスジェニックマウスの作製:TEL及びそのドミナント・ネガティブ体であるHLH (helix-loop-helix)欠失変異体ΔHLHをGATA-1プロモーター下に発現するトランスジェニックマウスを作製した。今後F1個体について、血算、骨髄の形態観察、各種サイトカインを用いた液体培養系での分化誘導実験、コロニー形成実験を行う予定である。さらに、TELは赤芽球分化を促進すると考えられるので、脱血及び低酸素状態のストレス下での赤芽球造血の評価を行う。
2.TELノックアウトマウスの作製:マウスTEL遺伝子の第6エクソン〜第8エクソンの一部をneomycin耐性遺伝子およびIRES-GFP遺伝子で置き換えたターゲッティングベクターを構築した。現在相同組み換えES細胞をクローニング中である。ヘテロマウスを用いてGFPを指標に胎生期のTELの発現部位を明らかにするとともに、ノックアウトマウスを用い胎生致死のレスキュー実験を行う。
3.TELコンディショナルマウスの作製:マウスTEL遺伝子の第6エクソンの両端とそれに続くneomycin耐性遺伝子の端にLox-P配列を挿入したターゲッティングベクターを作製し、ES細胞に遺伝子導入し相同組み換え体を得る方針である。さらに、この相同組み換え体にpMC1-Creベクターを導入し、Lox-P配列を挟む領域を欠失させる。neomycin耐性遺伝子のみを削った(I型欠失)相同組み換えES細胞、第6エクソンとneomycin耐性遺伝子を削った(II型欠失)相同組み換えES細胞を用いてキメラマウスの作製を行い、さらに交配によりヘテロマウス(I型欠失-TELflox/WT、II型欠失-TELΔ/WT)を得る。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Waga, K.: "Leukemia-related transcription factor TEL accelerates differentiation of Friend erythroleukemia cells."Oncogene. 22. 59-68 (2003)
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[Publications] Qiao, Y.: "Identification of a novel fusion gene, TTL, fused to ETV6 in acute lymphoblastic leukemia with t(12;13)(p13;ql4), and its implication in leukemogenesis."Leukemia. 17. 1112-1120 (2003)
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[Publications] Imai, Y.: "The corepressor mSin3A regulates phosphorylation-induced activation, intranuclear location, and stability of AML1."Mol.Cell.Biol.. 24. 1033-1043 (2003)
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[Publications] Maki, K.: "Leukemia-related transcription factor TEL is negatively regulated through ERK-induced phosphorylation."Mol.Cell.Biol.. (in press).
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[Publications] Yamaguchi, Y.: "AML1 is functionally regulated through p300-mediated acetylation on specific lysine residues."J Biol Chem.. (in press).
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[Publications] Ichikawa, M.: "AML-1 is required for megakaryocytic maturation and lymphocytic differentiation, but not for maintenance of hematopoietic stem cells in adult hematopoiesis."Nat Med.. (in press).
