口腔癌細胞における抗癌剤タキソテールと分化誘導剤ベスナリノン併用の抗癌効果の検索

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14657527
• Research Institution: The University of Tokushima
• Principal Investigator: 佐藤 光信 徳島大学, 歯学部, 教授 (00028763)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 原田 耕志 徳島大学, 歯学部, 助手 (60253217) ; 板東 高志 徳島大学, 歯学部, 助手 (80208727)
• Keywords: 口腔癌 / タキソテール / ベスナリノン / 抗癌効果 / p21^<Waf1> / p27^<Kip1> / pAkt / NF-kB

Research Abstract

1.ヒト口腔扁平上皮癌細胞(B88:p53野生型)及びヒト唾液腺癌細胞(TYS:p53 codon 281^<Asp→His> ; HSG,HSY,HSG-AZA3 : p53野生型)をベスナリノンで処理すると、p21^<Waf1>,p27^<Kip1>及びRAD50のup-regulationが惹起され、一方、pAkt,cyclin D1,cyclin-dependent kinase 2のdown-regulationの生じることを、RT-PCR及びWestern blottingにより明らかにした。特に、TYS細胞においては、変異型p53のdown-regulationがベスナリノンにより惹起された。また、タキソテール(TXT)とベスナリノンとの併用により、上記の遺伝子発現制御の増強が認められた。更に、両者の併用による細胞増殖の抑制は、isobologram解析により相乗効果であることが判明した。
2.上記の癌細胞をベスナリノンで処理すると、NF-kB活性が抑制されることをelectrophoretic mobility shift assayで明らかにした。また、TXTとベスナリノンで処理すると、Bax, Bakのup-regulation,Bcl-2のdown-regulationの惹起されることを遺伝し・タンパクレベルで明らかにし、アポトーシスの誘導が検出された。
3.ヒト全血液をTXT(0.01-10μg/ml)で処理すると、IFN-γ,TNF-α,IL-6及びIL-12の産生をELISAで検出した。
4.マウス由来Ba/F細胞にマウスToll-like receptor 4及びマウスMD-2遺伝子を導入して調製したtransfectantにおいて、TXTはNF-kBの転写活性化能を上昇させることを、luciferase assayにより検証した。

Research Products

• [Publications] Koji Harada: "Low p27^<Kip1> expression is associated with poor prognosis in oral squamous cell carcinoma"Anticancer Res.. 22・5. 2985-2990 (2002)
• [Publications] Keiko Aota: "Stable inhibition of NF-kB in salivary gland cells does not enhance sentitivity to TNF-α-induced apoptosis due to upregulation of TRAF-1 expression"Exp. Cell Res.. 276・2. 111-119 (2002)
• [Publications] Satoshi Hino: "Cytoplasmic TSC-22(transforming growth factor-β-stimulated clone-22) markedly enhances the ratiation sensitivity of salivary gland cancer"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 292・4. 957-963 (2002)
• [Publications] Supriatno: "Overexpression of p27^<Kip1> growth arrest and apoptosis in an oral cancer cell line"Oral Oncol.. 38・7. 730-736 (2002)
• [Publications] Mohammad O.Hoque: "Dysfunction of the p53 suppression pathway in head and neck cancer"Int. J. Oncol.. 21・1. 119-126 (2002)
• [Publications] Masato Okamoto: "Enhancement of anti-cancer immunity by lipoteichoic acid-related molecule isolated from a penicillin-killed group A Streptococcus agent, inathymic nude mice bearing human salivary adenocarcinoma : role of natural killer cells"Anticancer Res.. 22・6A. 3229-3240 (2002)