多型解析を用いた頭蓋顔面形態に関与する遺伝要因の探求

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14657545
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 高田 健治 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 教授 (50127247)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 高島 麻理子 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 助手 (30303986) ; 山下 和夫 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 助手 (50304316) ; 北井 則行 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 講師 (20271025)
• Keywords: 多型解析 / マイクロアレイ法 / ゲノムDNA / 顎変形症患者 / 頭蓋顔面形態 / 3次元画像情報

Research Abstract

1.本研究に同意した複数有志から血液試料を採取し、ゲノムDNAを精製した。
また、現時点で最も有力と考えられる候補遺伝子について、タンパク量を変化させる調節領域ならびにアミノ酸配列を変化させる翻訳領域のSNPをデータベースから抽出し、本実験に用いるDNAチップを作成するため、その中から適当なSNPの選択を進めている。予備実験として、選ばれたSNPの配列をシークエンス法により調べるために、まず、選択された中からさらにいくつかのSNPを選び、その両側を挟むPCRプライマーを作成し、前述のDNA試料の該当領域を増幅したのち、塩基配列の決定を行った。
DNA試料の該当SNP部における塩基配列が確定したものを用いて、マイクロアレイ法に必要な種々の手法を、オリゴマーの長さ、ハイブリダイゼーションの条件等を変化させ、最も高い感度、特異度が得られる方法を現在検討している。
同時に、Beckwith-Wiedemann症候群患者の家族の有志から血液試料を採取し、ゲノムDNAを精製した。そのDNAサンプルを同様の手法で分析し、変異遺伝子の同定を行った。
2.本学部附属病院矯正科受診の顎変形症患者(特に下顎前突症、上顎前突症)の頭蓋顔面形態をCTとMRIを用いて3次元情報として収集し保管している。その情報を従来の頭部X線規格写真の計測項目を基準として、左右差等の3次元要素を加えた新たな項目を用いて計測・分析中である。