2002 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
14658174
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Research Institution | Tokyo Metropolitan University |
Principal Investigator |
内山 一美 東京都立大学, 工学研究科, 助教授 (40151899)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中釜 達朗 東京都立大学, 工学研究科, 助手 (50244421)
下坂 琢哉 東京都立大学, 工学研究科, 助手 (40295473)
保母 敏行 東京都立大学, 工学研究科, 教授 (00087321)
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Keywords | バイオメムス / 微少流路 / 環境計測 / ダイオキシン / 酵素免疫測定 / 毒性 / 炭化水素レセプター / 表面 |
Research Abstract |
まずバイオメムスを利用した免疫化学的測定法を用いた環境計測についての調査研究を行った。現状ではマイクロチャネルを利用して免疫化学的測定を行うという方法はいくつか提案されているが、ほとんどすべてがマイクロビーズを利用したものである。申請者らも同様の提案をしているが、細胞免疫化学的方法については全く例がなく新規性が高いことがわかった。さらに研究の過程でチャネル内壁への抗体固定という新しい提案をすることができた。まずこれまで申請者らが開発したクロム蒸着ガラス板を用いたマイクロチャンネル用鋳型の作製条件を検討し,タンパク質の吸着抑制を行うための表面修飾について検討し、Y字形鋳型を用いた構造に決定した。次にイムノアッセイのマイクロ流路への適用性を検討するための送液方法について検討した。当初高電圧印可による電気浸透流を利用したポンプの導入を考えていたが、送液の再現性に考慮して微小流量シリンジポンプを用いて行った。これにより0.1〜100μL/分の流量で送液可能であった。蛍光試薬の検討を行った。標識化酵素としてはアルカリフォスファターゼを用い、基質にフルオレセインジフォスフェイトを用いることで高感度な蛍光発色が可能となった。光源としては現有のアルゴンイオンレーザーを用いた。このようなシステムを顕微レーザー蛍光を試作し行った。またPDMSマイクロチャネル内壁の特定部位に選択的に酵素を固定化する方法を考案し良好な結果を得ている。次年度以降はこの方法をさらに発展させる予定である。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Wei Xu, Katsumi Uchiyama, Toshiyuki Hobo: "Studies on Polyester Chips with Modified Inner Surface for Open-Chennel Electrochromatography"Chromatography. 23(3). 131-138 (2002)
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[Publications] Z.Chen, K.Uchiyama, T.Hobo: "Chemically modified chiral monolithic silica column for the enantioseparation by m-HPLC"J. Chromatogr. A. 942. 83-91 (2002)
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[Publications] Z.Chen, M.Niidzma, N.Tatsuro K.Uchiyama, T.Hobo: "Enantioseparations of dansyl amino acids unsing Cu(II) complexes with L-amino acylamides as chiral selectors in electrolytes by capillary electrophoresis"J. Sep. Sci.. 25. 1197-1201 (2002)
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[Publications] J-M.Lin, M.Nakagawa, K.Uchiyama, T.Hobo: "Comparison of three different anionic surfactants for the separation of hydrophobic compounds by nonaqueous capillary electrophoresis"Electrophoresis. 23. 421-425 (2002)
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[Publications] 内山一美: "高分子マイクロチャネルを用いるキャピラリー電気泳動"ぶんせき. No.5. 252-256 (2002)
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[Publications] 内山一美, 保母敏行: "マイクロチップ上の分析システム 高分子を用いたマイクロチャンネルの作製と電気泳動分析"化学と教育. 50(10). 682-685 (2002)