2002 Fiscal Year Annual Research Report
嗅覚神経系の髄鞘形成グリア細胞がもつ神経再生促進機能の分子生物学的研究
Project/Area Number |
14658252
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Research Institution | Gifu Pharmaceutical University |
Principal Investigator |
古川 昭栄 岐阜薬科大学, 薬学部, 教授 (90159129)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
新田 淳美 名古屋大学, 医学部, 助教授 (20275093)
野元 裕 岐阜薬科大学, 薬学部, 助教授 (80164747)
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Keywords | 髄鞘形成グリア細胞 / 嗅神経 / 軸索再生 / 中枢神経 / プロテオーム解析 |
Research Abstract |
末梢神経に比べ中枢神経の再生は困難であり内在的要因や微小環境が問題視されている。嗅覚ニューロンは日常的に死滅と新生を繰り返し、新生ニューロンは新しい軸索を嗅脳の定位置に伸ばしシナプスを形成する。この軸索再生は髄鞘を形成するユニークなグリア細胞(olfactory ensheathing glia : OEG)が担っている。本研究はOEGの機能に直結する特異的な遺伝子またはタンパク質を同定することを最終目標にしている。本年度はまず、成熟ラット嗅脳から純粋にOEGを培養する方法を確立した。嗅脳の培養細胞にはOEGのほかアストロサイトやニューロンが多数含まれている。そこでOEG表面に発現するp75に対する抗体を結合したビーズにOEGを選択的に結合させ、ほぼ純粋なOEG集団を得ることができた。OEGは形態的にシュワン細胞に類似しており、加えて細胞移動能の高い細胞であった。このOEGの易移動能と軸索再生能との間には何らかの関連性があるものと推定された。OEGとシュワン細胞はいずれも軸索再生を引き出す能力をもつが中枢性、末梢性の違いがある。そこでポリアクリルアミドゲルニ次元電気泳動を行って、両細胞の発現タンパク質パターンを比較した。その結果、OEGで増加している19個のスポットと、減少している12個のスポットを観察した。現在、差の顕著な数個のスポットについてタンパク種の同定のためトフーマススペクトルで解析中である。さらに、OEGの存在密度の高い嗅脳領域と低い同領域からmRNAを調製し、OEGに特異的に発現する遺伝子を同定するため、現在cDNAアレイ解析を実施している。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Ito et al.: "Neurotrophins facilitate production of choline acetyltransferase and hydroxylase in cultured mouse neural stem cells independently on their differentiation"Neuroscience Letters. 339. 231-234 (2003)
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[Publications] Ito et al.: "The growth arrest of PC12 cells by nerve growth factor is dependent on phosphatidylinositol 3-kinase/Akt pathway via p75 neurotrophin receptor"Journal of Neuroscience Research. (In press). (2003)
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[Publications] Ito et al.: "Neurotrophins facilitate neuronal differentiation of cultured neural stem cells via induction of mRNA expression of basic helix-loop-helix transcription factors Mash1 and Math1"Journal of Neuroscience Research. 71. 648-658 (2003)
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[Publications] Ito et al.: "Role of low-affinity p75 receptor in nerve growth factor-inducible growth arrest of PC12 cells"Journal of Neuroscience Research. 69. 653-661 (2002)
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[Publications] Sometani et al.: "4-Methylcatechol stimulates phosphorylation of Trk family neurotrophin and MAP kinases in cultured rat cortical neurons"Journal of Neuroscience Research. 198. 63-69 (2002)
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[Publications] Murakami et al.: "Accumulation of nerve growth factor protein at both rostral and caudal stumps in the transected rat spinal cord"Journal of Neurological Sci.ence. 198. 63-69 (2002)