青色光による気孔開口変異体の単離と原因遺伝子の同定

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14704003
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 木下 俊則 九州大学, 大学院・理学研究院, 助手 (50271101)
• Keywords: 気孔 / 孔辺細胞 / 青色光 / アブシジン酸 / フォトトロピン / プロトンポンプ

Research Abstract

本課題ではモデル植物シロイヌナズナを用いて青色光による気孔開口に変異の見られる変異体のスクリーニングを行い、その原因遺伝子の同定することを目的として研究を進めている。スクリーニングには様々なタイプの変異体を単離するため、T-DNA挿入株、アクチベーションタグ挿入株とEMS処理株を用いた。これまで、12,280個体のT-DNA挿入株、6,258個体のアクチベーションタグ挿入株と12,288個体のEMS処理株の1次スクリーニングを完了し、当初の目標数にほぼ到達することが出来た。さらに、2次スクリーニングを進め、T-DNA挿入株において5株とEMS処理株において24株の変異体を単離した。アクチベーションタグ挿入株においては、変異体を得ることができなかった。EMS処理株においては2次スクリーニングを継続中である。T-DNA挿入株より得られた変異体については、TAIL-PCRによる遺伝子の挿入箇所の同定を行い、5株中2株について、ゲノム中でのT-DNAの挿入箇所を同定した。今後はT-DNAの挿入した遺伝子の相補実験を行い、原因遺伝子を確定したい。また、T-DNAの挿入箇所の同定出来なかった株についてリーバースRCRなど他の方法で挿入箇所の同定を行いたい。EMS処理株の変異体については、現在、2次スクリーニングで得られた変異体について順次コロンビア品種との戻し交配とランズバーグ品種との掛け合わせを進めており、大まかな変異遺伝子の分類とマップベースクローニングによる遺伝子同定に向けての準備を進めている。

Research Products

• [Publications] Kinoshita et al.: "Blue-light-and phosphorylation-dependent binding of a 14-3-3 protein to phototropins in stomatal guard cells of broad bean."Plant Physiology. 133. 1453-1463 (2003)
• [Publications] Doi et al.: "A transgene encoding a blue-light receptor, phot1, restores blue-light responses in the Arabidopsis phot1 phot2 double mutant."J.Experimental Botany. 55・396. 517-523 (2004)