角膜内皮ジストロフィの原因遺伝子検索

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14770977
• Research Institution: Juntendo University
• Principal Investigator: 藤巻 拓郎 順天堂大学, 医学部, 助手 (50333042)
• Keywords: 角膜内皮ジストロフィ / COL8A1 / COL8A2 / VIII型コラーゲン / ヘテロデュープレックス法 / 候補遺伝子

Research Abstract

緒言:角膜内皮ジストロフィはFECD (Fuchs' endothelial corneal dystrophy)、PPMD (posterior polymorphous dystrophy)、CHED (congenital hereditary endothelial dystrophy)の3つに分けられ、それぞれ遺伝的多様性を持つ疾患と考えられている。2001年、FECDとPPMDの一部がVIII型コラーゲンα2鎖(COL8A2)遺伝子の変異と関連する事が報告された。
目的:VIII型コラーゲンはα1鎖2本とα2鎖1本の三重螺旋構造を持っていることから、α1鎖の遺伝子(COL8A1)も角膜内皮ジストロフィの候補遺伝子の一つと考え、ヘテロデュープレックス法を用いたWAVE^Rシステムで変異の有無を検討する。
対象、方法:平成10年から平成14年までに当科外来を受診し、説明と同意のもと抹消血DNA採血を行った、角膜内皮ジストロフィ患者14名(FECD10名(女性10名)、PPMD4名(男性1名、女性3名))と正常者47名を対象とした。各患者、正常者DNAのうちCOL8A1塩基配列をPCR (polymerase chain reaction)法で増幅。WAVE^Rシステムで正常者と異なるピークを示したものについて、オートシークエンサーにより塩基配列を確認した。
結果:患者1名にCOL8A1エクソン1のPCR産物が、WAVE^Rシステムで陽性であった。塩基配列ではCOL8A1の287番目の塩基がC→Tに変わり、ミスセンス変異(Ala96Val)をヘテロに持つことが確認できた。他の患者13名と正常者47名にこの変異は見出されなかった。
考察:PPMD患者にCOL8A1の変異が認められ、正常者47名から検出されなかった事から、COL8A1は角膜内皮ジストロフィの原因遺伝子の1つである可能性がある。

Research Products

• [Publications] A.Kobayashi1, K.Fujiki, A.Murakami, et al.: "Analysis of COL8A2 gene mutation in Japanese patients with Fuchs' endothelial dystrophy and posterior polymorphous dystrophy"Japanese Journal of Ophthalmology. (accepted).
• [Publications] A.Murakami, S.Kimura, K.Fujiki, T.Fujimaki, A.Kanai: "Mutations in Membrane Component Chromosome 1 Surface 1 (M1S1) gene in Gelatinous Drop-like Corneal Dystrophy"Japanese Journal of Ophthalmology. (accepted).
• [Publications] 藤巻拓郎, 他: "角膜内皮ジストロフィの原因遺伝子検索"第7回眼科分子生物研究会(平成15年3月8日、熊本). (2003)
• [Publications] T.Fujimaki, et al.: "Mutation Screening of Collagen Type VIII Alpha 1 Chain (COL8A1) in Patients with Corneal Endothelial Dystrophy"Association for Research in Vision and Ophthalmology (5/7/2003, Fort Lauderdale, FL U.S.A.). 3868/B571 (2003)
• [Publications] 藤巻拓郎, 他: "角膜内皮ジストロフィの原因遺伝子検索(会議録)"順天堂医学. 49巻3号. 370 (2003)
• [Publications] 藤巻拓郎, 他: "角膜内皮ジストロフィの原因遺伝子検索"第108回日本眼科学会総会(日本眼科学会雑誌)(平成16年4月17日、東京). (発表予定).