2003 Fiscal Year Annual Research Report

血管内皮細胞における流れずり応力の感知と生理機能解析に関する研究

Research Project

Project/Area Number	14780631
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	山本希美子東京大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (00323618)
Keywords	流れずり応力 / 血管内皮細胞 / P2Xレセプター / ノックアウトマウス / 機械的刺激感知 / ATP受容性チャネル
Research Abstract	P2X4のノックアウトマウスの作製と生理的・病理的意義の解析を以下の順に行った。 1)ES細胞への遺伝子導入と相同組替え体の解析ターゲティングベクターをES細胞(TT2)にエレクトロポレーションにより遺伝子導入し、更にG418により遺伝子導入された細胞を選別した。クローン細胞の中からゲノムDNAを抽出し、サザンブロッティングにより相同組替えしたクローン細胞を選別し、5クローンの相同組み替え体を得た。 2)キメラマウスの作製ターゲティングベクターを相同組替えしたES細胞のクローンをマウスの初期胚に導入し、得られた胚盤胞を擬妊娠ICRマウスに移植し、キメラマウスを作製した。他のICRマウスと交配させ、ジャームラインに乗っているキメラマウスを選別した。 3)ホモ遺伝子欠損マウスの作製キメラマウスとC57/B6を交配させ、生まれたマウスのゲノムをサザンブロッティングにより解析し、ヘテロマウスを選別した。ヘテロマウスの雄と雌を交配させ、ホモ遺伝子欠損、ヘテロ遺伝子欠損、そして野生型マウスを得た。 4)表現型の解析得られたマウスの組織・器官の表現型の違いを観察した。テールカフ方及び動脈挿管の直接測定による血圧の測定を行った所、ホモ遺伝子欠損マウスの血圧は収縮期血圧が有意に上昇した。これはCa^<2+>チャネルであるP2X4レセプター遺伝子が欠損した事により、NOによる血管拡張が起きにくくなったためと考えられる。また、in vivoにおける循環器系の観察及び、マウスから単離・培養した血管内皮細胞を用いたin vitroの実験系でP2X4を欠損させたことによる生理的・病理的な意義を検討した。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] K.Yamamoto, T.Takahashi, T.Asahara, J.Ando, et al.: "Proliferation, Differentiation, and Tube Formation by Endothelial Progenitor Cells in Response to Fluid Shear Stress."Journal of Applied Physiology. 95. 2081-2088 (2003)
[Publications] K.Yamamoto, T.Sokabe, N.Ohura, J.Ando, et al.: "Endogenously released ATP mediates shear-stress-induced Ca^<2+> influx into pulmonary artery endothelial cells."American Journal of Physiology. 285. H793-H803 (2003)
[Publications] N.Ohura, K.Yamamoto, S.Ichioka, J.Ando, et al.: "Global Analysis of Shear Stress-Responsive Genes in Vascular Endothelial Cells."Journal of Atherosclerosis and Thrombosis. 10. 304-313 (2003)
[Publications] M.Iwasaka, K.Yamamoto, J.Ando, S.Ueno: "Verification of magnetic field gradient effects on medium convection and cell adhesion."Journal of Applied Physics. 93. 6715-6717 (2003)
[Publications] D.Kaneko, T.Narita, J-P.Gong, Y.Osada.J.Ando, K.Yamamoto: "Thickness decrease of a grafted polyelectrolyte membrane exposed to shear flow."Journal of Polymer Science and Polymer Physics. 41. 2808-2815 (2003)
[Publications] 山本希美子, 安藤譲二: "ずり応力のカルシウムシグナリング"血管医学. 4. 267-273 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

血管内皮細胞における流れずり応力の感知と生理機能解析に関する研究

Principal Investigator

山本 希美子 東京大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (00323618)

Research Products

[Publications] K.Yamamoto, T.Takahashi, T.Asahara, J.Ando, et al.: "Proliferation, Differentiation, and Tube Formation by Endothelial Progenitor Cells in Response to Fluid Shear Stress."Journal of Applied Physiology. 95. 2081-2088 (2003)

[Publications] K.Yamamoto, T.Sokabe, N.Ohura, J.Ando, et al.: "Endogenously released ATP mediates shear-stress-induced Ca^<2+> influx into pulmonary artery endothelial cells."American Journal of Physiology. 285. H793-H803 (2003)

[Publications] N.Ohura, K.Yamamoto, S.Ichioka, J.Ando, et al.: "Global Analysis of Shear Stress-Responsive Genes in Vascular Endothelial Cells."Journal of Atherosclerosis and Thrombosis. 10. 304-313 (2003)

[Publications] M.Iwasaka, K.Yamamoto, J.Ando, S.Ueno: "Verification of magnetic field gradient effects on medium convection and cell adhesion."Journal of Applied Physics. 93. 6715-6717 (2003)

[Publications] D.Kaneko, T.Narita, J-P.Gong, Y.Osada.J.Ando, K.Yamamoto: "Thickness decrease of a grafted polyelectrolyte membrane exposed to shear flow."Journal of Polymer Science and Polymer Physics. 41. 2808-2815 (2003)

[Publications] 山本 希美子, 安藤 譲二: "ずり応力のカルシウムシグナリング"血管医学. 4. 267-273 (2003)

山本希美子東京大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (00323618)

[Publications] 山本希美子, 安藤譲二: "ずり応力のカルシウムシグナリング"血管医学. 4. 267-273 (2003)