2004 Fiscal Year Annual Research Report
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15208027
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
塩田 邦郎 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (80196352)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
土井 邦雄 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (70155612)
中山 裕之 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教授 (40155891)
高橋 伸一郎 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教授 (00197146)
田中 智 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教授 (90242164)
上塚 浩司 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助手 (60251419)
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| Keywords | DNAメチル化 / 肝臓 / 脂肪細胞 / パイロシークエンス法 |
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| Research Abstract |
本研究は、肝臓、胎盤、胎仔などの病態モデルを用いてエピジェネティックス異常と病態との関係を調べることを目的とする。そのため、ゲノムDNA上の数千箇所を対象にしたメチル化解析法であるRLGSによって病態モデルDNAメチル化データベースを完成させ、正常メチル化パターンとの比較により特定の毒物で誘導されるメチル化・脱メチル化異常ゲノム領域を決定し、DNAメチル化異常と病理変化の対応を目指す。これまで、in vitroモデル系の1つとして脂肪前駆細胞3T3L1の分化前後でのメチル化変化をRLGSにより解析し、脂肪細胞分化に伴いメチル化が変化するゲノム領域を複数同定し、さらに、コンピュータ上でRLGSを擬似的に行いそこから実際のRLGSで検出されたメチル化可変領域の配列決定を行う手法(virtual image RLGS, viRLGS)によるゲノム領域の同定を試みてきた。本年度は、-塩基単位でメチル化の程度を定量化できるパイロシークエンス法も確立し、3T3L1の分化に特異的なDNAメチル化領域の同定を継続して行った。また、脂肪細胞の分化抑制遺伝子として報告されているPref-1/Dlk1遺伝子の発現が、3T3L1の分化時にDNAメチル化によって抑制されていることを発見した。さらに、DNAメチル化パターンの維持にはDNAメチル基転移酵素(Dnmt)ファミリーメンバーのDnmt1のみではなく、従来新規メチル化酵素として類別されていたDnmt3aおよびDnmt3bもまた必要であることや、Dnmt1遺伝子座調節領域もまたDNAメチル化による制御を受け、その領域のメチル化が初期胚発生過程では各発生段階特異的なパターンを形成していることをそれぞれ発見し報告した。
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