JCウイルスAgnoに対するRNAiを用いた進行性多巣性白質脳症の治療法の開発

2005 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15300112
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 澤 洋文 北海道大学, 人獣共通感染症リサーチセンター, 教授 (30292006)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 高橋 秀宗 国立感染症研究所, 感染病理部, 室長 (70260271) ; 本山 昇 国立長寿医療センター, 研究所・老年病研究部, 室長 (50277282)
• Keywords: JC virus / Agnoprotein / siRNA

Research Abstract

我々はJCVを構成する遺伝子であるAgnoを欠損させると、JCV自体の増殖が抑制されるという事実を論文として報告し(J Neurovirol 7:302,2001)、さらに特許を取得した。本研究ではこの基礎的事実に基づき、Agnoに対するRNAi法を用いてJCVの増殖を抑制し、PMLに対する根本的な治療法を確立することを最終的な目的とする。現在までに我々は以下の研究を遂行した。
(1)Agnoに対するsiRNAを用いた場合、JCVの蛋白、mRNAの発現抑制およびJCV感染自体が抑制される事も確認した。この結果に関して特許を2件出願し、また論文としてJ Virol 78:7270,2004に報告した。さらにこれまでに報告が無かったJCV感染モデルをJCV感染細胞をマウス脳内に接種することにより作製した。このモデルマウスを用いて、siRNAを用い、JCV感染細胞の増殖を抑制することに成功した。現在この結果をまとめてJ Neurovirolに2006年、3月中に投稿する予定である。
(2)Agnoの蛋白と宿主因子との関係を検索するためにyeast two hybrid assayを行い、その結果としてheterochromatin protein 1 alphaまたfasciculation and elongation protein zeta 1と結合して、JCV粒子の核外輸送を促進することを明らかにし発表した(EMBO Rep 6:452,2005,J Biol Chem 280,24948,2005)。
(3)JCVの感染制御因子として、神経系細胞に特異的に発現する因子を単離する事を目的としDDXを単離することに成功した。この内容も現在英文としてまとめ、英文雑誌に投稿予定である。またその他にも共同研究として他の施設とウイルス感染における基礎的研究を行っている。

Research Products

• [Journal Article] Protection against influenza virus infection by intranasal administration of HA vaccine with chitin microparticles as an adjuvant. (2005)
  • Author(s): Hasegawa H, Ichinohe T, Strong P, Watanabe I, Ito S, Tamura S-i, Takahashi H, Sawa H, Chiba J, Kurata T, Sata T
  • Journal Title: J Med Virol 75 Pages: 130-136
  • Description: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [Journal Article] The agnoprotein of polyomaviruses : A multifunctional auxiliary protein. (2005)
  • Author(s): Khalili K, White MK, Sawa H, Nagashima K, SafaK M
  • Journal Title: J Cell Physiol 204 Pages: 1-7
• [Journal Article] Dissociation of heterochromatin protein 1 from lamin B receptor induced by human polyomavirus agnoprotein : role in nuclear egress of viral particles. (2005)
  • Author(s): Okada Y, Suzuki T, Sunden Y, Orba Y, Kose S, Imamoto N, Takahashi H, Tanaka S, Hall WW, Nagashima K, Sawa H*
  • Journal Title: EMBO Rep 6 Pages: 452-457
• [Journal Article] Identification of FEZ1 as a protein that interacts with JC virus agnoprotein and microtubules : role of agnoprotein-induced dissociation of FEZ1 from microtubules in viral propagation. (2005)
  • Author(s): Suzuki T, Okada Y, Semba S, Orba Y, Yamanouchi S, Endo S, Tanaka S, Fujita T, Kuroda S, Nagashima K, Sawa H*
  • Journal Title: J Biol Chem 280 Pages: 24948-24956
• [Journal Article] Isolation of a monoclonal antibody recognizing a cell-surface molecule as a receptor for JC virus. (2005)
  • Author(s): Henmi C, Sawa H*, Iwata H, Orba Y, Tanaka S, Nagashima K
  • Journal Title: Biochem Biophys Res Commun 327 Pages: 242-251
• [Journal Article] Synthetic double-stranded RNA [poly (I:C)] combined with mucosal vaccine protects against influenza virus infection. (2005)
  • Author(s): Ichinohe T, Watanabe I, Ito S, Moriyama M, Tamura S, Takahashi H, Sawa H, Chiba J, Kurata T, Sata T, Hasegawa H
  • Journal Title: J Virol 79 Pages: 2910-2919
• [Book] The JC virus-like particle overlay assay. In Methods in Molecular Biology (Lieberman PM (ed)). (2005)
  • Author(s): Sawa H, Komagome R
  • Total Pages: 175-186
  • Publisher: Humana Press, Totowa, NJ