ウシ周産期の好中球機能低下機構と胎盤・血清の網羅的プロテオーム解析

2004 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15380199
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 稲波 修 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 助教授 (10193559)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 桑原 幹典 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 教授 (10002081) ; 稲葉 睦 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 教授 (00183179) ; 佐藤 基佳 帯広畜産大学, 獣医学部, 教授 (50003140) ; 太田 利男 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 助教授 (20176895) ; 浅沼 武敏 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 助手 (40332473)
• Keywords: ウシ / 好中球 / シグナル伝達 / 二次元電気泳動 / ウシ妊娠関連タンパク質(bPAG) / AKT / NADPHオキシダーゼ / ケトン体

Research Abstract

本研究は乳房炎が頻発する産後直後の免疫機能低下の原因を好中球機能を中心に検索するとともに、乳房炎機能を明らかにすることを目的とする。そのためにウシ好中球機能の活性化のためのシグナル伝達機構の解明を行い、周産期での好中球機能さらには母胎側の好中球機能に影響を与える因子の同定と機能を明らかにするために実験を行った。PKCdelta阻害剤rottlerinを処理すると、OZによるウシ好中球のNADPHオキシダーゼの活性は1/2に低下した。しかし、刺激によるNADPHオキシダーゼコンポーネントp47^<phox>の膜への移動ならびに細胞骨格重合促進には影響を与えなかった。これらの広域PKC阻害剤であるGF109203Xではp47^<phox>の膜への移動を抑制することから、PKCアイソフォームによって制御の様式が違うことが示された。胎盤・血清中での抑制因子の探索では、分子量180kDaのタンパク質、トランスフェリンならびにラクトフェリンが骨髄芽球から好中球への分化時に見られるNADPHオキシダーゼ発現に抑制的な影響を与えることを見いだした。さらに、上記の抑制因子のうち、ウシラクトフェリンは乳汁中に含まれ、乳房での免疫制御に関与している可能性が示唆されたので、これについてサイトカイン誘導に及ぼす効果を検討した。LPSあるいはConA刺激したラットマクロファージと単球のINF-γ、IL-1β、TNF-α、IL-12p40ならびにiNOSのmRNA発現を検討したところ、INF-γとIL-1βのみがLPSで誘導が観察され、ウシラクトフェリンはこれらの炎症性サイトカインの誘導を強く抑制した。以上のことからラクトフェリンは乳房での炎症制御に強く係わっている可能性が示唆された。

Research Products

• [Journal Article] Effects of antioxidants on X-ray- or hyperthermia-Induced apoptosis In human lymphoma U937 cells. (2004)
  • Author(s): Cui, Z.-G., Kondo, T., Feril, Jr., L.B., Waki, K., Inanami, O., Kuwabara, M.
  • Journal Title: Apoptosis 9 Pages: 757-763
  • Description: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [Journal Article] Activation of C-kit by stem cell factor induces radioresistance to apoptosis through ERK-dependent expression of survivin in HL-60 cells (2004)
  • Author(s): Hosseinimehr, S.J., Inanami, O., Hamasu, T., Takahashi, M., Kashiwakura, I., Asanuma, T., Kuwabara, M.
  • Journal Title: Journal of Radiation Research 45 Pages: 557-561
  • Description: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [Journal Article] A novel anticancer ribonucleoside,1-(3-C-ethynyl-β-D-ribo-pentofuranosyl)cytosine, radiosensitizes apoptosis in tumor cells. (2004)
  • Author(s): Inanami, O., Iizuka, D., Iwahara, A., Yamamori, T., Kon, Y., Asanuma, T., Matsuda, A., Kashiwakura, I., Kitazato, K., Kuwabara, M.
  • Journal Title: Radiation Research 162 Pages: 635-645
• [Journal Article] Phosphoinositie3-kinase regulates the phosphorylation of NADPH oxidase component p47^<phox> by controlling cPKC/PKCδbut not Akt. (2004)
  • Author(s): Yamamori, T., Inanami, O., Nagahata, H., Kuwabara, M.
  • Journal Title: Biochemical Biophysical Research Communications 316 Pages: 720-730
• [Journal Article] Protection against malonate-induced ischemic brain injury in rat by a cell-permeable peptidic JNK inhibitor,(L)-HIV-TAT^<48-57>-PP-JBD_<20>, observed by the ADC-mapping MRI method. (2004)
  • Author(s): Asanuma, T., Inanami, O., Tabu, K., Waki, K., Kon, Y., Kuwabara, M.
  • Journal Title: Neuroscience Letters 359 Pages: 57-60
• [Journal Article] Decreased apoptosis of β-integrin-deficient bovine neutrophils. (2004)
  • Author(s): Nagahata, H., Higuchi, H., Teraoka, H., Takahashi, K., Inanami, O., Kuwabara, M.
  • Journal Title: Immunology and Cell Biology 82 Pages: 32-37
• [Journal Article] 物質レベルでの時間と空間 (2004)
  • Author(s): 桑原 幹典
  • Journal Title: 癌と臨床 50(13) Pages: 1051-1054
• [Journal Article] NADPHオキシダーゼ活性化機構とウシ分娩後の好中球機能低下 (2004)
  • Author(s): 稲波 修, 脇 研二, 山盛 徹, 浅沼 武敏, 中島崇行, 永幡 肇, 桑原幹典
  • Journal Title: 獣医生化学 51 Pages: 1-13
• [Journal Article] Different radiosensitive megakaryocytic progenitor cells exist in steady-state human peripheral blood
  • Author(s): Kashiwakura, I., Inanami, O., Abe, Y., Takahashi, T.A., Kuwabara, M.
  • Journal Title: Radiation Research (印刷中)
• [Journal Article] Post-irradiation hypoxic incubation of X-irradiated MOLT-4 cells reduces apoptotic cell death by changing the intracellular redox state and modulating SAPK/JNK pathways.
  • Author(s): Hamasu, T., Inanami, O., Tsujitani, M., Yokoyama, K., Takahashi, E., Kashiwakura, I., Kuwabara, M.
  • Journal Title: Apoptosis (印刷中)
• [Journal Article] Enhanced induction of apoptosis by combined treatment of human carcinoma cells with X rays and death receptor agonists.
  • Author(s): Hamasu, T., Inanami, O., Asanuma, T., Kuwabara.M.
  • Journal Title: Journal of Radiation Research (印刷中)
• [Journal Article] Reduction of concanavalin A-induced expression of interferon-γ by bovine lactoferrin in feline peripheral blood mononuclear cells.
  • Author(s): Kobayashi S., Sato R., Inanami O., Yamamori T., Yamato O., Maede Y., Sato J., Kuwabara M., Naito Y.
  • Journal Title: Veterinary Immunology and Immunophathology (印刷中)
• [Journal Article] X Irradiation Induces the Proapoptotic State Independent of the Loss of Clonogenic Ability in Chinese Hamster V79 Cells
  • Author(s): Iizuka D., Inanami O., Matsuda A., Kashiwakura I., Asanuma T., Kuwabara M.
  • Journal Title: Radiation Research (印刷中)