胆、膵疾患に関わる遺伝子の発現調節、遺伝子多型の関与、発症のメカニスム

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15390237
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Research Institution: Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology
• Principal Investigator: 宮坂 京子 (財)東京都高齢者研究・福祉振興財団, 東京都老人総合研究所・生体機能調節と加齢研究グループ, 副参事研究員 (90166140)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 瀧口 総一 独立行政法人国立病院機構, 九州がんセンター・臨床研究部, 研究員 (00280793) ; 太田 稔 財団法人東京都高齢者研究, 福祉振興財団・東京都老人総合研究所・生体機能調節と加齢研究グループ, 研究助手 (70133634)
• Keywords: コレシストキニンA受容体 / 遺伝子多型 / 糖尿病 / SHIP-2 / 遺伝子ノックアウロマウス / 肥満 / 胆石 / インスリン

Research Abstract

ヒト胆嚢は、-80℃凍結後、genomic DNAをフェノール抽出法により、mRNAをAGPC法により調整する。末梢血液のgenomic DNAはLSMによる単核球画分の調整後にフェノール抽出法によりえ、胆嚢のCCK-A受容体(R)遺伝子発現調節をcompetitive PCRによる測定を行った。結果は、胆石症胆嚢33例と正常胆嚢10例においては、有意の相違が認められなかった。継ぎに調整したDNAをメチル化感受性の制限酵素であるHpaIIで第一回目のDNA消化を行い、第2の制限酵素として、EcoRIを用いて解析断片のサイズを小さくし、電気泳動をおこなった。胆石ではメチル化がより高度におこっていたが、遺伝子多型との有意の関わりは認められなかった。CCK-AR遺伝子多型は慢性膵炎、膵臓がん症例におけるリスクファクターにはなっていなかった。
胆石は肥満度と相関することから、インスリン抵抗性に関与すると思われるSH2-Containing Inositol 5-Phosphatase2(SHIP2)遺伝子多型をしらべ、多型の存在を発見した。SHIP2はインスリンのシグナル伝達の抑制因子であり、SHIP2の機能が亢進するとインスリン抵抗性を示すことが想定される。プロモーター領域に2ケ所の塩基(-157GtoA,+121CtoT)変異が検出され、HL60細胞での転写活性が変化した。脂肪細胞にtransfectionし、やはり、転写活性の低下をみとめた。さらに2000余名のcohort集団における多型発生頻度の確認とNIDDM,BMIなどのパラメーターとの比較を行ったろこと、多型は健常人に5%、食事療法による治療に反応する軽症糖尿病群では10%に増加していた。CCK-AR遺伝子KOマウスでは雌CCK-AR(-/-)マウスでの1年齢の胆石形成頻度は雄マウスと同じであった。

Research Products

• [Publications] Miyasaka K, Ichikawa M, et al.: "Physical activity prevented age-related decline in energy metabolism in genetically obese and diabetic rats, but not in control rats"Mech Aging and Develop. 124. 183-190 (2003)
• [Publications] Sato N, Miyasaka K, et al.: "Lack of cholecystokinin(CCK)-A receptor enhanced gallstone formation : A study in CCK-A receptor gene knockout m"Dig Dis Sci. 48. 1944-1947 (2003)
• [Publications] Ichikawa M, et al. Miyasaka K.: "Bitter melon-malt venegar increases daily energy turnover in rats"J Nutr Sci Vita. 49. 428-433 (2003)
• [Publications] Sato N, et al. Miyasaka K.: "Central administration of ghrelin stimulates pancreatic exocrine secretion via the vagus in conscious rats"Jpn J Phsyiol. 53. 443-449 (2003)
• [Publications] Shimazoe T, et al. Miyasaka K.: "Role of 5-HT1B receptors in entrainment disorder of Otsuka Long Evans Tokushima Fatty(OLETF)rats"Neuroscience. 123. 201-205 (2004)
• [Publications] Miyasaka K, Yoshida Y, et al.: "Association of cholecystokinin-A receptor gene polymorphism with alcohol dependence in a Japanese population"Alcohol and Alcoholism. 39. 25-28 (2004)
• [Publications] Miyasaka K, Yoshida Y, et al.: "Association of Cholecystokinin-A Receptor Gene Polymorphisms and Panic Disorder in Japanese"Am J Med. (In press). (2004)
• [Publications] Suda H, Jimi A, Miyasaka K, et al.: "Histopathological difference between chronic pancreatitis amimal models and human chronic pancreatitis"Pancreas. (In press). (2004)
• [Publications] Miyasaka K, Ichikawa M, et al.: "Physiological and pathological age-associated changes in diurnal rhythm of energy expenditure in rats"Arch Geriat Gerontol. (In press). (2004)
• [Publications] Miyasaka K, Ohta M, et al.: "Enhanced gastric emptying of a liquid gastric load in mice lacking cholecystokinin-B receptor : A study of CCK-A, B, and AB receptor gene knockout mice"J Gastroenterol. (In press). (2004)
• [Publications] 宮坂京子, 金井節子他: "コレシストキニンーA,B,AB受容体遺伝子ノックアウトマウスのエネルギー代謝"消化と吸収. 25. 21-24 (2003)
• [Publications] 船越顕博, 宮坂京子: "胆石とコーヒー、緑茶"肝胆膵. 46. 139-145 (2003)
• [Publications] 船越顕博, 内村浩太郎, 宮坂京子: "肥満症"日本臨床. 61. 479-484 (2003)
• [Publications] 佐藤紀一, 船越顕博, 宮坂京子: "コレシストキニン受容体の胃排出速度に及ぼす影響"消化器科. 37. 225-229 (2003)
• [Publications] 船越顕博, 川波賢子, 宮坂京子: "飲酒、喫煙と膵癌発狂リス"医学のあゆみ. 208. 163-165 (2003)
• [Publications] 宮坂京子, 篠崎博嗣他: "ヒト遊離膵腺房からのアミラーゼ分泌:CCK-A,B受容体いずれもアミラーゼ分泌に関与しない"膵臓. 18. 91-92 (2003)