2003 Fiscal Year Annual Research Report
腎尿細管および糸球体細胞の再生医学の腎疾患治療への基礎的検討
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15390265
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Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
寺田 典生 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助教授 (30251531)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
井下 聖司 東京医科歯科大学, 医学部附属病院, 助手 (00345307)
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| Keywords | ES細胞 / Wnt-4 / AQP2 / 尿細管 / 足突起細胞 / Nephrin / Podocin / HGF |
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| Research Abstract |
マウスEmbryonic stem細胞(Wild-ES細胞)から、Embryoid body (EB body)を作成し、腎構成細胞(足突起細胞、尿細管細胞)への分化誘導を試みた。さらにWnt4とLacZ cDNAを導入したWnt4-ES細胞を使用して、尿細管細胞への分化誘導を試みた。RT-PCRによりPax2,WT1はEB細胞初期より発現が認められ、nephrin, podocinはEB細胞のday5〜7において、podocalyxin, podoplaninはday26に至るまで発現が認められた。蛍光免疫染色では、EB細胞の一部がnephrin, podocin染色陽性であった。Western blotにてEB細胞でpodocinの蛋白発現を確認した。Wnt4-EB細胞の二次元培養での蛍光免疫染色では、HGFとactivinの存在下にてAQP(aquaporin)2染色陽性が認められた。Western blotにてWnt4-EB細胞でAQP2の蛋白発現を確認した。三次元培養でHGFとactivinの存在下にてWnt4-EB細胞は、尿細管様構造を呈しRT-PCRによりAQP2陽性であった。in vivoでは、Wnt4-EB細胞を腎皮質に注入すると、4週間後に腎にteratomaの形成とAQP2陽性の管腔構造が認められた。以上よりES細胞からの腎構成細胞への分化誘導の可能性が示唆され、今後分化誘導因子をさらに検討してゆく。
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Research Products
(4 results)
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[Publications] Terada Y et al.: "Wnt4 Expression and function of the developmental gene Wnt-4 during experimental acute renal failure in rats"J Am Soc Nephrol. 14. 1223 (2003)
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[Publications] Shimamura H et al.: "The PI3-kinase-Akt pathway promotes mesangial cell survival and inhibited apoptosis in vitro via NF-kB and Bad"J Am Soc Nephrol. 14. 1427 (2003)
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[Publications] Asai T et al.: "Pathogenesis of nephrogenic diabetes insipidus by aquaporin-2 C-terminus mutations"Kidney International. 64. 2 (2003)
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[Publications] Yamashita Y et al.: "Glomerulonephritis after methicillin-resistant Staphylococcus aureus infection resulting in end-stage renal failure"Infectious Diseases Review. 1. 8 (2003)
