2004 Fiscal Year Annual Research Report
新規インターフェロン様蛋白Limitinのシグナル解析とヒト型遺伝子同定
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15390300
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
織谷 健司 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (70324762)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
冨山 佳昭 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (80252667)
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| Keywords | インターフェロン / INF-ζ / Limitin / シグナル / アポトーシス / 骨髄抑制 / Daxx |
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| Research Abstract |
IFN-αやIFN-βと相同性を有する事実・IFN-α/β受容体と結合する事実・抗ウイルス活性を有する事実に基づき、我々が同定したlimitinは新種のI型IFNと認められIFN-ζと命名された。作製したリコンビナントIFN-ζ/limitinを用い、IFN-ζ/limitinの生理活性をIFN-αと同一実験系にて直接比較した。IFN-ζ/limitinは、腫瘍細胞増殖抑制・MHC class I発現増強・CTLキラー活性増強に関しIFN-αと同等の生理活性を示した。一方、正常骨髄球・Bリンパ球・巨核球前駆細胞に対するIFN-ζ/limitinの増殖抑制作用は、IFN-αと比較して減弱していた。次に、培養巨核球を用いIFN-ζ/limitinやIFN-αによる増殖抑制シグナルを解析した。IFN-ζ/limitinは、IFN-αと同程度のStat1リン酸化やSOCS-1遺伝子発現を誘導した。しかし、IFN-ζ/limitinは、IFN-αと比較してTyk2活性化および巨核球前駆細胞増殖抑制に重要であるDaxx遺伝子発現やCrkリン酸化誘導が減弱していた。我々はDaxx分子と細胞増殖抑制の関係を解析し、Daxx蛋白をBa/F3細胞に過剰発現させるとFasを介するアポトーシス誘導が増強されることを明らかにするとともに、Daxx蛋白との新しい結合蛋白としてDMAP1やTSG101を同定した。ハイブリダイゼーションやゲノムシクエンス解析を行なったが、ヒト型IFN-ζ/limitin遺伝子を同定できなかった。そこで、IFN-ζ/limitin様ヒトIFNの構築を目的としてIFN-ζ/limitinとIFN-αのシークエンスの違いに基づき種々のアミノ酸置換IFN-αを作製した。本研究成果は、IFN-ζ/limitin様ヒトIFNの構築に貴重な情報を提供するだけでなく、副作用を減らす新しいIFN治療戦略確立に寄与するものである。
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