| Research Abstract |
本研究ではシロイヌナズナを用いて,小胞体hsp70システムが植物の発生・分化のどの過程をどのように制御しているのかを明らかにすることを目的としている.本年度は,小胞体のhsp70であるBiPの優性欠損変異体を,LAT52プロモーターによって花粉で発現するシロイヌナズナ形質転換体を作製した.得られた形質転換体は花粉形成には欠損を示さなかったが,変異BiP遺伝子の次世代への伝達に欠損を示し,BiP変異体の発現による花粉機能の欠損誘導を示唆する結果を得た.また,シロイヌナズナBiP1遺伝子の欠損変異株を取得し,昨年度取得したBiP2遺伝子の欠損変異株との交配を行った.これまでにBiP1とBiP2を共に欠損した株は取得できていないが,BiP1とBiP2各遺伝子を様々なコピー数の組み合わせでもつ植物体を作製した.同時に,BiPのパートナータンパク質として機能する,小胞体のJドメインタンパク質についての解析も行った.出芽酵母小胞体のJドメインタンパク質である,Jem1p, Scj1p, Sec63pのシロイヌナズナホモログを同定し,GFP融合タンパク質を用いた解析から,これらがシロイヌナズナの小胞体に局在することを示唆する結果を得るとともに,これらの遺伝子発現が小胞体ストレスで誘導されることを示した.さらに,これらホモログの遺伝子破壊株の作製を行ったところ,Jem1pとScj1pのシロイヌナズナホモログの破壊は致死とはならず,これら遺伝子の機能はシロイヌナズナの生育に必要ではないことが示された.一方,シロイヌナズナの2つのSec63pホモログのうち,一方の遺伝子破壊は致死とはならず,これは生育に必須でないことが明らかとなったが,もう一方の遺伝子破壊株を得ることはできなかった.
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