2003 Fiscal Year Annual Research Report
T細胞のアポトーシスにおけるClC-3Bの役割とその制御機構
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15590221
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| Research Institution | Chiba University |
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Principal Investigator |
小倉 武彦 千葉大学, 大学院・医学研究院, 助手 (00292673)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中谷 晴昭 千葉大学, 大学院・医学研究院, 教授 (60113594)
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| Keywords | クロライドチャネル / T細胞 / アポトーシス / チロシンリン酸化 |
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| Research Abstract |
1.ClC-3チャネル蛋白のチロシンリン酸化:T細胞のアポトーシスにおいて重要な働きをする細胞容積調節性Cl^-チャネルは、非受容体型チロシンキナーゼp56^<lck>によるリン酸化を受けて活性化するといわれている。COS7細胞に発現させたClC-3AおよびClC-3B蛋白は、いずれも共発現させたp56^<lck>によりチロシンリン酸化を受けた。さらに、ClC-3Bはsrc、fyn、lyn、sykなど他の非受容体型チロシンキナーゼによってもリン酸化を受けることが明らかとなった。現在、ClC-3Bに占変異を導入し、リン酸化を受けるチロシン残基の決定を試みている。また、レトロウイルスベクターを用いて、FLAG-Tagを融合させたClC-3B蛋白を安定的に発現するJurkat T細胞株をすでに樹立しており、これを用いて実際にClC-3BがT細胞レセプター(TCR)刺激やfas刺激によりチロシンリン酸化を受けるか否か、およびその生理的意義を検討している。
2.ClC-3ノックアウトマウス(ClC-3 KO)を用いた解析:ClC-3 KOの胸腺細胞の総数は、野生型マウス(WT)のそれと比較して有意に少なかった。また、脾臓T細胞の数もClC-3 KOにおいて有意に少なかった。TCR刺激による細胞増殖は、胸腺細胞、脾臓T細胞ともにClC-3 KOにおいて有意に抑制されていた。胸腺細胞の分化については、WTとClC-3 KOの間で差はなかった。活性化させたT細胞に抗CD3抗体や抗fas抗体を用いてアポトーシスを誘導した場合の細胞死は、WTとClC-3 KOの間で差はなかった。ClC-3 KOのT細胞には比較的大きな電流密度のCharybdotoxin感受性K^+電流が発現しており、これがClC-3チャネルの欠損を代償している可能性を考慮しつつ解析を進めている。
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Research Products
(7 results)
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[Publications] Ohtsuka M.: "Role of Na^+-Ca^<2+> exchanger in myocardial ischemia/reperfusion injury : evaluation using a heterozygous Na^+-Ca^<2+> exchanger knockout mouse model"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 314・3. 849-853 (2004)
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[Publications] Matsuura K.: "Adult cardiac Sca-1 positive cells differentiate into beating cardiomyocytes"J.Biol.Chem.. Dec 31. (2003)
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[Publications] Iijima Y.: "Beating is necessary for transdifferentiation of skeletal muscle-derived cells into cardiomyocytes"FASEB J.. 17・10. 1361-1363 (2003)
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[Publications] Hanada, E.: "Inhibitory effect of erythromycin on potassium currents in rat ventricular myocytes in comparison with disopyramide"J.Pharm.Pharmacol.. 55・7. 995-1002 (2003)
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[Publications] Suzuki M.: "Cardioprotective effect of diazoxide is mediated by activation of sarcolemmal but not mitochondrial ATP-sensitive K^+ channels in mice"Circulation. 107. 682-685 (2003)
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[Publications] 中谷晴昭: "心血管系におけるK_<ATP>チャネルの役割"心電図. 23・S3. 3-18 (2003)
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[Publications] 中谷晴昭: "不整脈2003"メディカルレビュー社. 215 (2003)
