2004 Fiscal Year Annual Research Report
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15590499
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| Research Institution | Tokai University |
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Principal Investigator |
田中 朝雄 東海大学, 医学部, 助手 (50192175)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
鬼島 宏 東海大学, 医学部, 助教授 (90204859)
田中 真奈実 (独)産業技術総合研究所, ブラディオン連携研究体, 研究体長 (80188341)
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| Keywords | ブラディオン / 大腸癌 / セプチンファミリー / リアルタイムPCR法 / イムノクロマトグラフィー法 / 診断 / 治療 / モニターシステム |
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| Research Abstract |
本研究は、代表者らにより新規に単離・抽出された大腸癌特異的発現物質ブラディオン(Bradeion)を用いた癌特異的診断技術の開発と、最終的には治療技術開発(創薬も含む)を目的とする。
平成16年度において、我々はブラディオンが癌細胞の加速された細胞分裂を可能にするエネルギー供給システムの核となるGTPaseであることを証明し、その酵素活性を測定し、ブラディオンタンパク質の構造解析のための結晶化に成功した(論文1)。現在、論文2に用いた技術により、その結晶を用いて構造解析を行うとともに、その活性中心特異的阻害剤探索の研究を進めている。
また、同定したブラディオンタンパク質のGTPaseとしての酵素活性部位の遺伝子配列を発現ベクターに挿入し発現させ、ブラディオンタンパク質を純化し、それに対するモノクローナル抗体を作製した。すでに作製してあるブラディオンタンパク質全体に対するモノクローナル抗体や今回作製した抗体を用い、培養大腸癌細胞や大腸癌患者組織で免疫組織化学を行い、癌特異的染色の有無や細胞内認識部位を特定した。
さらに、治療技術の一つとして、RNA干渉技術を用いたブラディオン塩基配列特異的RNAiを設計し、(1)合成RNAi、(2)導入細胞内で効率よくsiRNAを転写すべくプロモータ保有プラスミッドDNAに結合させたsiRNA、(3)アデノウイルスに結合させたsiRNA、を培養大腸癌細胞に導入し、その細胞への影響を調べた。前2者についてはRNAiの導入効率が低いため、細胞への形態変化や増殖速度に影響はなかった。現在アデノウイルスベクターを用い、培養大腸癌細胞への影響を調べている。さらにsiRNA遺伝子含有アデノウイルスベクターを導入した大腸癌細胞をヌードマウスに移植し、癌細胞の増殖速度を測定中である。
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Research Products
(2 results)
