2004 Fiscal Year Annual Research Report
急性パラコート中毒による肺線維化の機構とその進展阻止治療薬の探索研究
| Project/Area Number |
15590571
|
|---|
| Research Institution | Asahikawa Medical College |
|---|
Principal Investigator |
塩野 寛 旭川医科大学, 医学部, 副学長 (20112451)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松原 和夫 旭川医科大学, 医学部, 教授 (20127533)
浅利 優 旭川医科大学, 医学部, 助手 (40360979)
|
|---|
| Keywords | パラコート / 肺障害 / 酸化的ストレス / ACE阻害作用 / 一酸化窒素 / アポトーシス |
|---|
| Research Abstract |
パラコート(PQ)の急性毒性は肺及び腎障害を起こし、慢性毒性は中枢神経障害を生じることが知られている。各種抗酸化剤(vitamin C及びvitamin E)およびACE阻害薬(captopril、enalapril)は、PQ毒性を抑制し生存率を向上させた。そこで、hydroxypyrolineを肺線維化のマーカーとして検討したところ、各種抗酸化剤およびACE阻害薬であるcaptoprilによって著明にPQによる生成が阻害された。ACE阻害薬がPQの肺毒性を抑制するものと考えられた。そこで、その機序を解明するために、PQ投与2日および7日後の肺ホモジーネートにつて、SDS-PAGEを行った。Cleaved caspase-3およびnitrotyrosine抗体によって、ウェスタンブロットを行い、抗体で染まった蛋白をアクチンを指標として半定量化した。PQ投与によって、nitrotyrosine抗体に反応する蛋白質が著明に増加し、PQ肺毒性に一酸化窒素による酸化ストレスの関与が示された。また、nitrotyrosine抗体に反応する蛋白質は96Kdが最も強く、Mn-SODと考えられた。Mn-SODは、活性中心tyrosine残基を有し、ニトロ化されると活性を失うことが知られている。従って、PQによる酸化ストレスは更に増大されるものと考えられた。一方、アポトーシスのマーカーであるcleaved caspase(17および19Kd)は、わすかであるがPQによって検出された。これらの変化は、PQ投与2日後から著明に観察された。captoprilによって、これらの蛋白質の出現が著明に減少した。従って、ACE阻害薬は、PQによる酸化障害を防御し、PQ中毒時の治療薬として期待できるものと考える。
|
